1.2基因工程的基本操作程序复习目标1、简述基因工程原理及基本操作程序
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程
复习重点基因工程基本操作程序的四个步骤
复习难点(1)从基因文库中获取目的基因
(2)利用PCR技术扩增目的基因
预学案一、目的基因的获取:1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的
2.获取目的基因的常用方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库
基因组文库:含有一种生物的基因②种类部分基因文库:含有一种生物的基因,如文库
③建立目的:为获得大量的目的基因作准备
④目的基因的获取根据目的基因的有关信息:基因的序列、基因的、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因
(2)利用PCR技术扩增目的基因
①PCR:是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术
②条件:有一段已知目的基因的序列
③过程:目的基因DNA受热后解旋为,与结合,然后在的作用下进行延伸形成DNA
④方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)化学合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以通DNA合成仪用化学方法直接
例1、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是:①从基因文库中获取目的基因;②利用PCR技术扩增目的基因;③反转录法;④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③二、基因表达载体的构建1.表达载体的组成:目的基因+++标记基因等
2.启动子:位于基因的,它是的部位,驱动基因转录产生mRNA
3.终止子:位于基因的,终止
4.表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以给下一代;使目的基因能够和发挥作用
5.标记基因:作用是受体细胞是否含有目的基因
6.由于受体细胞有植物、动物、微生物之分,以及目的基因导入受体细胞