植物基因工程 Part I 植物基因工程概论 Water,fertilizer,and farmchemicals42%Variety38%Cultivationand others20%The contributions of different methods in raising crop out-put (FAO, 1998). 从 1983 年第一例转基因植物（烟草）问世，到 1993 年，世界上转基因成功的植物就已突破 60种；从 1986 年首批转基因作物获准进行田间实验，到 1993 年获准进行田间实验的转基因植物已达 1025 例，涉及 38 种植物。这十年是植物转基因的研究走向应用的重要准备阶段。 ‘83 ‘84 ‘85 ‘86 ‘87 ‘88 ‘89 ‘90 ‘91 ‘92 ‘93 ‘94 ‘95 ‘96 ‘97 ‘98 ‘99 ‘00 ‘01 ‘02FirsttransgenicplantDelay-ripening tomatoCommercialized in the USFirst field testsHerbicide resistant, insect resistant plants commercializedGM maize approved by EU First Bt corn plants Rotting resistant tomato approved by FDA 1. 植物基因转移的主要方法 载体为媒介的转移方法农杆菌介导的转移方法病毒为载体的转化方法 直接转移技术基因枪法花粉管通道法原生质体法PEG 介导的转化法 2 农杆菌介导的转化方法 根癌农杆菌 根癌农杆菌是一种土壤微生物，在双子叶植物中导致冠瘿病的形成。冠瘿瘤的形成是由于 Ti(tumor inducing) 质粒导致的。 2.1 根癌农杆菌 农杆菌有四种类型：章鱼碱（ octopine ）胭脂碱（ nopaline ）农杆碱（ agropine ）琥珀碱（ succinamopine ） 2.1 根癌农杆菌 Ti 质粒分为 4 个区T-DNA 区Vir 区（ Virulence region) Con 区（ region encoding conjugation)Ori 区（ origin of replication) 2.2 转化 利用 Ti 质粒将目的基因引入植物 将基因插入 T-DNA 中，细菌就可以将它整合到植物的染色体 DNA中。 问题： Ti 质粒分子太大。 200kb 的分子中无法找到单一切点的酶。 2.2 转化双元载体策略共整合策略 2.2 转化 双元载体策略 (binary vector system)双元载体系统是将 T-DNA 连在一个小质粒上， Ti 质粒的其他的部分以正常的状态存在。 2.2 转化 共整合策略 (cointegrative system) 利用以 pBR322 或相似的大肠杆菌载体，但含有一小部分 T-DNA 。基因可以插入小的质粒的单一酶切位点上。 2.2 转化 只有利用“卸甲”的...
