分析化学实验报告 实验题目: 邻二氮杂菲分光光度法测定铁 学 院: 专 业: 食品科学与工程 班 级: 姓 名: 学 号: 同组者姓名: 一.实验目的 1
了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法 2
掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法 3
了解722型分光光度计的构造和使用方法 二.实验原理 1
光度法测定的条件:分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长,吸光度范围和参比溶液等
在PH=2-9的条件下,Fe2+与邻二氮杂菲(o-ph)生成极稳定的橘红色配合物,反应式如下: 此配合物的lgK稳 =21
3 摩尔吸收系数ε510 =1
1×104 在显色前,首先用盐酸羟胺把Fe2+ 还原成Fe3+
其反应式如下: 2Fe 3+ +2NH 2 OH· HC1 =2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1- 测定时,控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜
酸度过高时,反应进行较慢;酸度太低,则Fe 2+水解,影响显色
三、实验仪器 分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶 NNNNNNNNFe + Fe2+32+四、实验步骤 1
条件实验 (1)吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液 5 mL 于 50 mL 容量瓶中,加入 5%盐酸羟胺溶液 1 mL,摇匀,加入 1 mol·L-1NaOAc 溶液 5 mL 和 0
1%邻二氮杂菲溶液 3 mL
以水稀释至刻度,摇匀
放置10 min ,在 722 型分光光度计上,用 1 cm 比色皿,以水为参比溶液,波长从 570 nm 到 430 nm 为止,每隔 10 nm 测定一次吸光度
如图 1 所示,其最大吸收波长为 510 nm,故