百度文库1 实验一薄层层析板的制备一、实验目的制备薄层层析板，使叶绿素在层析板上分离显色。二、实验原理薄层层析，常用 TLC（Chromatography ）表示，又称薄层色谱，属于液－固吸附色谱。 是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法， 它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。 一方面适用于小量样品 （几到几十微克， 甚至 0.01 μ g ）的分离；另一方面若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达 500mg 的样品。因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。薄层吸附色谱的吸附剂最常用的是氧化铝、硅胶、硅藻土、聚酰胺和纤维素。其颗粒大小 , 一般要求直径为 10～40μ m。硅胶是无定形多孔性物质，略具酸性，适用于酸性物质的分离和分析。薄层色谱用的硅胶分为：“硅胶 H ”—不含粘合剂；“硅胶G ”—含煅石膏粘合剂；“硅胶HF 254 ”—含荧光物质，可用于波长为 254nm 紫外光下观察荧光；“硅胶GF 254 ”—既含煅石膏又含荧光剂等类型。粘合剂除上述的煅石膏（半水合硫酸钙： 2CaSO4 · H 2O ）外，还可用淀粉、羧甲基纤维素钠。三、实验材料、器具1、试剂硅胶、 4‰的 CMC溶液（羧甲基纤维素钠）2、实验用具：药匙、研钵、载玻片、量筒、玻棒四、实验步骤1、载玻片要求平滑清洁，没有划痕，在使用前可用洗涤液或肥皂水洗涤，再用水冲洗干净。（干净的标准：水不是呈股流下，而是呈瀑布状态流下。）2、与硅胶混合： CMC－Na 溶液与硅胶的比例为3:1(3ml ：1g)。取 CMC－Na 溶液倒入研钵中，然后加入硅胶，在研钵中研磨，按一个方向研磨，自下而上，然后自上而下，以赶尽气泡为佳。3、铺板：将载玻片置于平台上，用药匙舀取糊状硅胶，均匀地铺在载玻片表面。铺板时，可以顺着板中间倒， 也可以顺着某个边缘倒， 也可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上， 倒时也要注意不要引入小气泡。尤其是载板的四个角， 容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。后轻颠几下薄层板即可。颠好的板，表面看上去要光滑平整， 没有气孔。 薄层板铺好后一定要放置在平的台面上，否则难保证板面硅胶的厚度均匀。（3g 硅胶大约可铺 7.5 ×2.5cm 载玻片 5-6 块）4、晾干：置水平台上于室温下晾干。5、活化：将晾干的板子在105℃烘箱中干燥 30min，然后 取出，放入干燥器中，备用。活化硅胶有利于提高硅胶的吸附性能，同时排除...
