CD4+和CD8+T-淋巴细胞检测操作细则VIP专享

CD4+和 CD8+T 淋巴细胞检测操作细则1.目的根据《全国艾滋病检测技术规范》(2009 年修订版)，对 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞检测(流式细胞仪 FACSCalibur）的操作进行细化，以规范本中心 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞检测工作，保证结果准确。2.适用范围本操作细则适用于本中心 CD4+和 CD8+T T 淋巴细胞检测。3.职责3.1 检测人员负责按本操作细则进行 CD4+和 CD8+T T 淋巴细胞检测。3.2 复核人员负责对 CD4+和 CD8+T T 淋巴细胞检测操作及结果进行复核。3.3 科室负责人负责对检测工作进行综合管理。4.操作程序4.1 方法：流式细胞仪单平台法。4.2 设备：生物安全柜、振荡器、移液器、流式细胞仪FACSCalibur.4.4 试剂：经国家食品药品监督管理局注册批准，批批检合格，在有效期内的商用 CD4+和 CD8+的检测试剂。 4.5 检测步骤4.5.1 标本制备：4.5.1.1 将试剂盒取出置于室温，平衡 30 分钟。然后按需要取出相应数目的绝对计数管 TruCount Tube，按顺序依次编号。4.5.1.2 用反向加样法在 Tube 中加入 50ul 充分混匀的抗凝全血，注意血不要碰到试管底部的微球（Beads）。4.5.1.3 取 20ul 荧光抗体加入到管中，注意：不要碰到血。涡旋混匀，室温避光放置 15min。4.5.1.4 取出加入 450ul 1×FACS 溶血素，充分混匀，避光放置 15min。4.5.1.5 24 小时内上机用 MultiSET 软件获取细胞进行检测，上机前应充分混匀。4.5.2.FACSCalibur 上机操作：4.4.2.1执行 FACSCalibur 开机程序，进入 MultiTEST 软件。4.4.2.2在出现的“Sign in”窗口中输入操作者姓名、单位、领导姓名等相关信息，计算机将保存这些信息，单击“Accept”。4.4.2.3进入“Set up”窗口：在“Data Source”对话框中选择“From Cytometer: Acquisition and Analysis”， 在“Entry Level File Name Prefix”中选择“Sample name”； 在“Automatic Saving Options”中选择“Data File”、“Laboratory Report”、“Physician Report”，软件会自动生成一个文件，文件的默认路径 Facstation\BD file\ Multiset \DDMMYY 文件夹；在“View Reports”中选择“Until ‘Next’Button Pressed”。4.4.2.4单击“Accept”，进入“FACSComp”窗口，单击“Skip FACSComp”。4.4.2.5进入“Test Prefs”窗口，在“Physician Report Choices”中，这一项可以是全选，运行了一种试剂，会自动报告相应的结果。在窗口的最下方...