二可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)摘要: 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法
二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在 620 nm 处有最大吸收
在 10 -100 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法
二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在 620 nm 处有最大吸收
在 10 -100ug 范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比
这一方法有很高的灵敏度,糖含量在 30ug 左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用
一般样品少的情况下,采纳这一方法比较合适
三、仪器、试剂和材料 1 、仪器 (1)分光光度计 (2)电子顶载天平 (3)三角瓶: 50m1 X 1 (4)大试管: 9 支 (5)试管架,试管夹 (6)漏斗,漏斗架 (7)容量瓶: 50rnl X 2 (8)刻度吸管: 1m1X3 , 2m1X1 , 5mlX1 (9)水浴锅 2、试剂 (1)葡萄糖标准液: l00ug/ml (2)浓硫酸 (3)蒽酮试剂 :0
2g 蒽酮溶于 100 ml 浓 H2SO4 中当日配制使用
3、材料 小麦分蘖节
四、操作步骤 1 、葡萄糖标准曲线的制作 取 7 支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液: 管号 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液( ml ) 0 0
8 蒸馏水( ml ) 1 0
2 葡萄糖含量( ug ) 0 10 20 30 40 60 80 在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4
0m1 ,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖玻璃球,以防蒸发
自水浴重新煮沸起,准确