专题5课题1DNA的粗提取与鉴定一、课题目标1.知识目标a.了解DNA的物理化学性质。b.理解DNA粗提取与鉴定的原理。2.能力目标a.掌握DNA粗提取及鉴定方法。b.利用DNA的性质进行实验设计和操作。3.情感目标通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。二、课题重点DNA的粗提取和鉴定方法。三、课题难点DNA的粗提取和鉴定方法。四教学流程教学流程教师活动学生活动设计意图环节二:讲授新课一、基础知识1.提取DNA的方法通过介绍DNA的溶解性和DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,让学生体会提取DNA的方法。(1)DNA的溶解性①不同浓度的NaCl溶液中溶解度让学生分析教材图5-1“DNA在NaCl溶液中溶解度曲线,回答问题,理解DNA溶解度随NaCl溶液浓度的变化情况。问题1.DNA在NaCl溶液中的溶解度如何变化?在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。问题2.如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?当氯化钠的物质的量浓度为2mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。②讲述:DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离。(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性讲述DNA对蛋白酶、高温和洗涤剂的耐受性。①蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。②大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。③洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。2.DNA的鉴定介绍DNA的鉴定方法。①二苯胺染色法DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色②甲基绿染色法甲基绿与DNA结合,呈绿色【典型例题】阅读、思考、回答。演练、回答。了解DNA的物理化学性质;理解DNA粗提取与鉴定的原理。掌握DNA粗下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()(多提取及选)A.新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B.植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破C.DNA不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液D.溶有DNA的NaCl溶液中加人二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色【答案】CD【方法点拨】1.新鲜猪血中大量成熟红细胞内无DNA2.植物材料需先用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁再吸水胀破3.DNA不溶于95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液二、实验设计讲述实验设计几个方面内容,再以动画形式展现以鸡血细胞为材料进行DNA的提取和鉴定。1.实验材料的选取(1)选取原则DNA含量丰富材料易得提取简便(2)选材鸡血细胞2.破碎细胞,获取含DNA的滤液(1)动物细胞加入蒸馏水,搅拌过滤后收集滤液(2)植物细胞加入洗涤剂和食盐,搅拌研磨后过滤收集滤液3.去除滤液中的杂质问题1:滤液中的杂质可能有哪些细胞成分?核蛋白、多糖和RNA等杂质展示三种方案,让学生分析回答问题。方案一:30mL含DNA的滤液+2mol/LNaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液问题2:为什么反复地溶解与析出DNA,能够除去杂质?用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去在低盐溶液中的杂质。方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→静置10~15分钟→DNA滤液方案三:30mL滤液→60~75℃恒温保温10~15分钟→过滤获得DNA滤阅读、倾听、思考、回答。进行实验设计。演练、回答。鉴定方法;利用DNA的性质进行实验设计和操作。液问题3:方案二与方案三的原理有什么不同?方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白质,使提取的DNA与蛋白质分开;方案三是利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,使蛋白质变性,与DNA分离。4.DNA的析出与鉴定(1)析出:滤液+同体积冷却95%酒精→白色丝状物(2)溶解:将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中(3)鉴定:DNA+二苯胺→蓝色物(沸水浴5分钟)【典型例题】下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂,错误的是()相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA2mol/LNaCl溶液...