研究报告微生物学通报FEB20，2008，35(2)：161~165Microbiology©2008byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn腐蚀生物膜垢中硫酸盐还原菌的系统进化分析陈悟1,2汪文俊2向福2余龙江2*曾庆福1(1.武汉科技学院环科所武汉430073)(2.华中科技大学生命与科学技术学院武汉430074)摘要:从油田回注水系统加压泵后的管道管壁生物膜垢里分离得到的一株嗜热、嗜酸、异养型硫酸盐还原菌,编号为CW-04。该菌株兼性厌氧、革兰氏阳性、有极生鞭毛、直或弯曲的短杆状,能产孢子,最佳生长温度47,℃在20~63℃℃下培养基中均能使测试瓶有黑色沉淀产生。从腐蚀防治的角度研究该菌株的生长曲线。主要生理生化特性包括:生长pH范围为3.7~10,最佳生长pH为6~6.5,最佳生长盐度为0.7%。能够在H2+醋酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、丙酮酸盐和乙醇等电子供体中生长,也能够利用葡萄糖、果糖和简单的氨基酸作为唯一碳源生长;能够在硫酸钠、硫代硫酸钠、亚硫酸钠等电子受体中生长,但是不能利用硝酸盐和硫磺。通过16SrDNA测序以及系列比对分析:该菌属于细菌界(Bacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、梭菌纲(Clostridia)、梭菌目(Clostridiales)、蛋白胨链球菌科(Peptococcaceae)、脱硫肠状菌属(Desulfotomaculum),与该属中的种Desulfotomaculumaeronauticumd相似性达到99%。关键词:硫酸盐还原菌,脱硫肠状菌属,系统进化,16SrDNA,PCRLineagesEvolutionAnalysisofSulfate-reducingBacteriaintheCorrosionBiofilmCHENWu1,2WANGWen-Jun2XIANGFu2YULong-Jiang2*ZENGQing-Fu1(1.TheResearchCentreofEnvironmentalScience,WuhanUniversityofScience&Engineering,Wuhan430073)(2.SchoolofLifeScience&Technology,HuazhongUniversityofScience&Technology,Wuhan430074)Abstract:Anewthermophilic,acidityphilic,sulfate-reducingheterotrophicbacteria,strainCW-04,wasisolatedfrombiofilmdirtinessinpipelinewallafterpresspumpofaffusionsysteminoilfield.Thebacteriumisanconcurrentlyanaerobic,non-motile,Gram-positive,poleflagellum,spore-formingcurvedrodgrowingwithinapHrangeof3.7~10(optimalgrowthatpH6~6.5)andtemperaturerangeof20℃~63℃(optimalgrowthat47℃),then,growthcurvewasstudiedtoefficientlypreventcorrosion.TheoptimumNaClconcentrationforgrowthis0.7%.Alimitednumberofcompoundsareutilizedaselectrondonors,includingH2+acetate,formate,acetate,lactate,propionate,pyruvateandethanol.Sulfate,sulfiteandthiosulfate,butnotsulferornitrate,canbeusedaselectronacceptors.StrainCW-04isabletoutilizeglucose,fructoseandsimpleaminophenolassourcesofcarbon.Analysisofthe16SrDNAsequenceallowedstrainCW-04(accessionnumbers:AY703033)tobeclassifiedasarepresentativeofanewstrainofthegenusDesulfotomaculum,Desulfotomaculumaeronauticumd(Bacteria,Firmicutes,Clostridia,Clostridiales,Peptococcaceae)whosesimilarityis99%.*通讯作者：Tel:027-87792265;:yulongjiang@hust.edu.cn收稿日期：2007-06-25;接受日期:2007-08-06眉题2Keywords:Sulfate-reducingbacteria,Desulfotomaculum,Lineagesevolution,16SrDNA,PCR原油在长时间的开采过程中,地层需要注水来维持油气输出压力,而输水所用的长金属管道管壁在水的生境中,极易形成由水体沉积物和微生物组成的生物膜垢[1,2]。人们通过对生物膜垢的形成[3]、结构[4]和微生物群落分析[5,6]得出:生物膜的形成是微生物腐蚀(MicrobiologicallyInfluencedCorrosionMIC)发生的必要条件,也是微生物的金属腐蚀难以防治的主要原因。本论文首次采用纯培养的方法直接从回注水系统的管壁膜垢中分离纯化得到一株耐温、嗜酸产孢子的脱硫肠状菌。从腐蚀防治的角度来研究它的生长代谢规律、生理生化特性,并通过对基因16SrDNA序列的测定进一步确定了该菌株的分类学和系统发育地位。1材料和方法1.1分离源和分离纯化方法菌株来自中石化中原油气高新股份有限公司文南油田联合污水处理站,菌株CW-04取自回注水系统加压泵后的碳钢管道管壁生物膜垢经富集、分...
