表皮生长因子对人角膜内皮细胞损伤修复的影响VIP免费

作者简介:赵靖,女,1971年8月出生,辽宁省海城市人。1994年毕业于白求恩医科大学临床医学专业,获学士学位,1999年毕业于青岛大学医学院,获眼科学硕士学位,1999年至今就读青岛大学医学院攻读眼科学博士学位,角膜病专业,导师为著名眼科专家谢立信教授。2000年曾获青岛市科技进步二等奖。联系电话:053225876380(O),传真:053225891110,E2mail:hexuzhaojing@sohu.comAboutZHAOJing:female,whowasbornin1971.PhD.Tel:053225876380(O),E2mail:hex2uzhaojing@sohu.com收稿日期:2001208214修回日期:2002203204本文编辑:刘雪立△基金项目:山东省卫生厅资助项目(编号:981040101)作者单位:266071山东青岛,山东省眼科研究所Receiveddate:Aug14,2001Foundationitem:ShandongProvinceHealthBureauFounda2tion(No:981040101)FromtheShandongEyeInsti2tute,Qingdao266071,ShandongProvince,China表皮生长因子对人角膜内皮细胞损伤修复的影响△赵靖谢立信史伟云臧新杰Effectsofepidermalgrowthfactoronwoundheal-inginhumancornealendothelialcellscultureZHAOJing,XIELi2Xin,SHIWei2Yun,ZANGXin2Jie【Keywords】epidermalgrowthfactor;epidermalgrowthfactorreceptor;cornea;en2dothelialcell【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofhumanepidermalgrowthfactor(EGF)onwoundhealinginhumancornealendothelialculture.Toexamineepidermalgrowthfactorreceptor(EGFR)inthesecells.MethodsWoundwasmadeinconfluentsecondarycultureofhumancornealendothelialcells.Afterwounding,1、10、50and100Λg·L-1EGFwereaddedandwoundhealingwasevaluatedbyinvertedmicroscope.ThecontrolscontainednoEGF.EGFRwasexaminedbyindirectimmunofluorescencebeforewoundingat1、3、7、14daysafterwounding.ResultsEGFenhancedthegrowthoftheen2dothelialcellsinadose2dependentmanner.TheenhancingresponsestoEGFpeakedat10Λg·L-1,thendecreasedathigherconcentrations.TheexpressionoftheEGFRwasfoundintheendothelialcells.ConclusionEGFenhancesthewoundhealinginhumancornealendothelialculture.HumancornealendothelialcellsexpresseEGFR.[RecAdvOphthalmol2002;22(3)∶170-172]【关键词】表皮生长因子;表皮生长因子受体;角膜;内皮细胞【中图分类号】R772.2【文献标识码】A【文章编号】100325141(2002)0320170203【摘要】目的观察人表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)对人角膜内皮细胞损伤修复的影响,检测人角膜内皮细胞表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorrecep2tor,EGFR)的表达。方法胎儿角膜内皮细胞体外培养传一代融合后,定量损伤细胞,倒置显微镜下观察不同浓度EGF对角膜内皮细胞损伤修复的影响,并于损伤前及损伤后1、3、7、14d用间接免疫荧光的方法检测角膜内皮细胞EGFR的表达。结果EGF促进人角膜内皮细胞损伤愈合,并显示剂量依赖性,EGF在10Λg·L-1时促进作用达高峰,浓度再增高促进作用下降。人角膜内皮细胞损伤前及损伤后均在细胞膜上表达EGFR,表现为细胞膜上绿色荧光,在未损伤区的细胞及缺损区修复的细胞均见表达。结论EGF促进人角膜内皮细胞损伤修复,人角膜内皮细胞表达EGFR。[眼科新进展2002;22(3)∶1702172]角膜内皮细胞的重要功能之一是保持角膜的透明性。这种功能只有角膜内皮完整时才能发挥作用。内皮细胞单层的损伤将导致泵功能的破坏,继而导致角膜水肿[1]。成人的角膜内皮在损伤后再生能力有限,所以,外伤特别是内眼手术引起的角膜内皮细胞密度的下降是临床上角膜混浊的主要原因之一[2]。某些生长因子可能作为有丝分裂原影响着角膜内皮的损伤修复[3]。本研究目的旨在观察人表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)对人角膜内皮细胞损伤修复的影响,检测培养的人角膜内皮细胞表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达。1材料与方法1.1人角膜内皮细胞体外培养取胎龄7～10个月的胎儿眼球12只,死亡时间在6h以内,于超净工作台内剪除眼球表面筋膜组织,置1∶1000妥布霉素溶液中浸泡30min。彻底刮除上皮,剪下角膜,于内皮面滴少量2.5g·L-1胰蛋白酶·071·眼科新进展20...