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Caveolin21表达对血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的调节作用VIP免费

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[文章编号]100723949(2002)1020520379205·实验研究·Caveolin21表达对血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的调节作用严鹏科,廖端芳1,杨永宗2(中南大学病理生理学教研室,湖南省长沙市410072;南华大学1.药物药理研究所2.心血管病研究所,湖南省衡阳市421001)[主题词]Caveolin21;肌,平滑,血管;脂蛋白,低密度;胆固醇流出[摘要]通过观察天然和氧化型低密度脂蛋白对细胞内胆固醇转运蛋白caveolin21表达的影响,探索动脉粥样硬化发生过程中血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的分子机制。运用Western印迹、逆转录—聚合酶链反应等方法观察天然和氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞caveolin21表达的影响及其差异;运用反义寡核苷酸技术和高效液相色谱、放射性胆固醇标记法等方法初步判断下调caveolin21表达对血管平滑肌细胞胆固醇流出的影响;运用外源基因导入技术观察caveolin21过度表达对氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞内胆固醇聚集的调节作用。结果发现:①以正常的未修饰低密度脂蛋白(50mgΠL)与血管平滑肌细胞孵育96h,caveolin21表达增加60.2%±3.9%,胆固醇流出率为81.7%±4.3%;而在相同量的氧化型低密度脂蛋白刺激下,caveolin21表达减少了54.7%±5.8%,胆固醇流出率下降至26.8%±5.1%。②caveolin21反义寡核苷酸预处理血管平滑肌细胞,再予50mgΠL的正常低密度脂蛋白处理,细胞胆固醇流出率下降至45.3%±7.3%。③抗氧化剂普罗布考显著对抗氧化型低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞caveolin21表达的抑制作用。④外源导入caveolin21表达质粒显著促进氧化型低密度脂蛋白损伤后的细胞胆固醇转运,抑制细胞内胆固醇聚集,细胞总胆固醇含量由175.7±8.9mgΠg蛋白下降至88.6±3.8mgΠg蛋白。上述结果提示,caveolin21介导的细胞胆固醇转运和流出是调节血管平滑肌细胞胆固醇平衡的重要机制;氧化型低密度脂蛋白抑制血管平滑肌细胞caveolin21表达,可能是其导致细胞胆固醇代谢障碍、诱导平滑肌源性泡沫化细胞形成的分子机制之一。[中图分类号]R363[文献标识码]AInfluenceofCaveolin21onCholesterolEffluxinVascularSmoothMuscleCellsYANPeng2Ke,LIAODuan2Fang1,andYANGYong2Zong2(DepartmentofPathophysiology,SouthCenterUniversity,Changsha,410072;1.TheInstituteofPharmacy&Pharmacology,2.InstituteofCard2iovascularDiseases,NanhuaUniversity,Hengyang421001,China)[MeSH]Caveolin21;Muscle,Smooth,Vascular;Lipoproteins,LDL;CholesterolEfflux[ABSTRACT]Aimtostudytheroleofcaveolin21invascularsmoothmusclecells(VSMC)cholesterolhomeostasis.MethodWesternblotandRT2PCRwasperformedtoevaluatetheeffectsofnativelowdensitylipoprotein(n2LDL)oroxidizedlowdensitylipoprotein(ox2LDL)onexpressionofcaveolin21inVSMCcellularcholesterolefflux,cholesterolcontentandlipiddropletsofVSMCweredeterminedbyusing[3H]cholesteroldetection,HPLCandnileredstainrespectivelyResultsTheresultsshowedthatn2LDL(50mgΠL)increasedcaveolin21expressionby60.2%±3.9%,andpromotedcholesteroleffluxrateto81.7%±4.3%.However,ox2LDL(50mgΠL)downregulatedcaveolin21abundanceby54.7%±5.8%anddeducedcholesteroleffluxrateto26.8%±5.1%.Inaddition,thecholesteroleffluxratealsosignificantlydecreasedwhenVSMCharboringcaveo2lin21antisence.Caveolin21overexpressionbytransfectedPcl2neo2cav21inVSMCresultsadramaticallydecreaseintotalcellularcholesterolcontentandlipiddropletsinducedbyox2LDL(50mgΠL).ConclusionsCaveolin21mediatescellularcholesteroleffluxinvascularsmoothmusclecells,whichisanimportantmechanismofregulatingcellularcholesterolbalance.Dowmregula2tioncaveolin21expressionisinvolvedinfoamcellformationderivedfromvascularsmoothmusclecellinducedbyox2LDL.[收稿日期]2002208223[修回日期]2002209220[基金项目]国家自然科学基金(30171084)资助和国家973(G2000056905)资助。[作者简介]严鹏科,男,1967年11月出生,湖南省长沙县人,中南大学病理学和病理生理学博士研究生,...

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