第2卷第2期2000年6月沈阳医学院学报JOURNALOFSHENYANGMEDICALCOLLEGEVol.2No.2Jun.2000阿特拉津对小鼠微核及精子畸形率的影响张越金焕荣段志文赵肃(沈阳医学院预防医学系劳动卫生学教研室,沈阳110031)摘要目的探讨阿特拉津对小鼠的致突变性。方法应用小鼠骨髓细胞微核试验和精子畸形试验。结果骨髓微核实验结果为阴性(P>0105);高剂量组(438mg�kg)精子畸形率显著升高(P<0105),但无剂量反应关系,亦不能定为阳性结果。结论在本实验条件下阿特拉津无致突变作用。关键词阿特拉津;微核;精子畸形阿特拉津(Atrazine),又名莠去津,是目前应用最广泛的化学除草剂之一,适用于玉米、高梁、果园和林地。阿特拉津投入商业使用已近40年,目前已在世界各国广泛应用。国外对其环境残留及毒性研究报道较多,但对其致突变性研究报道较少,且结论不一[1,2]。有实验证实,3ppb的阿特拉津可使仓鼠染色体破裂;有人则认为阿特拉津的威胁并非很大。阿特拉津对哺乳动物是否具有致突变性,是否应禁止生产或限量使用,是目前需解决的问题。本文旨在通过对阿特拉津致突变性的观察,为其生产及应用前景提供科学依据。1材料与方法111受试物市售吉林化工厂生产的38%阿特拉津悬浮剂。112实验对象实验动物采用昆明小白鼠,由本院实验动物中心提供。113实验方法11311骨髓细胞微核试验将体重20～26g,雌雄各半的小鼠40只随机分为5组,每组8只,即阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺80mg�kg)、阿特拉津高剂量组1�4LD50(438mg�kg)、中剂量组1�8LD50(210mg�kg)和低剂量组1�16LD50(109mg�kg)。采用间隔24h,2次灌胃给药。于第2次染毒后6h将鼠处死,取其胸骨剃除肌肉,用弯止血钳挤出骨髓液于预先滴好1滴小牛血清的载玻片上,混匀后推片,干后甲醇固定10min,晾干后1∶10Giemsa染色15min,于油镜下每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞(PCE),观察含有微核的PCE数,并计算其微核率。11312精子畸形试验选用性成熟雄性小鼠50只,体重18～25g,随机分为5组,每组10只,各组给药剂量同微核试验。采用连续5日灌胃染毒,于首次染毒后35d处死小鼠,取双侧附睾,以高青[3]方法制片,甲醇固定5min,2%伊红染色30min,冲洗晾干后镜检。每只小鼠高倍镜下采用双盲法计数1000个完整精子,畸形的判定及分类参照黄幸纾[4]方法,计算精子畸形率。11313数据统计及处理方法小鼠骨髓细胞微核率及精子畸形率用ς2检验。建立FOXBASE+数据库,用SAS软件进行统·27·计分析。2结果211阿特拉津对小鼠骨髓细胞微核率的影响(表1)由表1可见阿特拉津小鼠骨髓PCE的微核率与阴性对照组比较差异无显著性(P>0105)。表1不同剂量阿特拉津对小鼠骨髓微核率的影响组别nPCE数微核PCE数微核率(‰)生理盐水77000142100阿特拉津109mg�kg77000182157210mg�kg77000202186438mg�kg77000223114环磷酰胺77000138191173333与阴性对照组比较P<0101212阿特拉津对小鼠精子畸形率影响(表2)由表2可见,虽然阿特拉津各剂量组的畸形率均高于阴性对照组,但经统计学分析,只有438mg�kg剂量组差异有显著性(P<0105),但无剂量反应关系。表2不同剂量阿特拉津对小鼠精子畸形率的影响组别n精子数畸形数畸形率(%)生理盐水66000971162阿特拉津109mg�kg770001201171210mg�kg880001461183438mg�kg8800016821103环磷酰胺66000354519033与阴性对照组比较3P<0105,33P<01013讨论本研究小鼠骨髓微核试验结果表明,虽然各剂量组的微核率均高于阴性对照组,但经统计学分析差异无显著性(P>0105)。微核实验结果为阴性,该结果与Thomas[5]等的报道结果相符,说明阿特拉津不能引起染色体损伤。但曾有报道3ppb的阿特拉津可使仓鼠染色体断裂[6]。若要确认阿特拉津为一种非断裂剂,尚需做更进一步的研究。用其它微核试验方法如胎盘转移微核试验和肝细胞微核试验等若均为阴性,则更有说服力。在小鼠精子畸形试验中,各剂量组精子畸形率均高于阴性对照组,但经统计学分析中低剂量组差异不显著(P>0105),只有高剂量组(438mg�kg)的差异显著(P<0105),说明阿特拉津在一定剂量下对小鼠生殖细胞可能存在遗传损伤,干扰精子的正常生成与成熟过程。出现这种情况,应作一次重复试验,才能得出肯定结论。因为将一种化学物判定为异常精子诱导剂的尺度至少...
