采用LC/MS/MS结合改进的QuEChERS方法对动物源食品中的36种兽药进行筛查作者Jin-LanSun，ChangLiu，YueSong安捷伦科技（中国）有限公司，上海，200131，中国Jian-ZhongLi安捷伦科技（中国）有限公司，北京，100102，中国应用简报食品检验和农业摘要本应用简报介绍了一种改进的QuEChERS方法，可对食品中的四类兽药——磺胺类、大环内酯类、喹诺酮类和氯吡多进行筛查。改进的QuEChERS方法包括一个萃取盐包（4gNa2SO4+1gNaCl）和一个分散SPE试剂盒（50mgPSA、150mgC18EC和900mgNa2SO4）；萃取溶剂采用含1%乙酸的乙腈。采用该方法萃取这四类兽药均可获得满意的回收率。采用LC/ESI/MS/MS，在动态多反应监测（DMRM）模式下对这些兽药进行定量分析。方法得到的检出限符合这四类兽药的各MRL要求，并且平均回收率超过50%，因此满足常规分析的需要。2前言QuEChERS方法最初用于水果和蔬菜中的农药萃取[1]。QuEChERS操作分为两个步骤，萃取/分配和分散SPE（d-SPE）。在第一步中，乙腈作为萃取溶剂；使用硫酸镁和盐促进分配/萃取。在第二步中，采用d-SPE去除萃取物中的基质干扰。d-SPE的材料一般包括N-丙基乙二胺（PSA）、封端C18（C18EC）和石墨化碳黑（GCB）。通过验证，QuEChERS方法已被用于多种样品基质的处理。相比于水果和蔬菜，本文涉及到的动物源食品样品需要在d-SPE过程中采用PSA和C18EC去除这类样品中增加的蛋白质和脂类干扰。本文分析的兽药不需要使用QuEChERS缓冲盐，即原AOAC或ENQuEChERS方法系用于萃取pH不稳定农药的盐。本方法由于其高选择性和高灵敏度，在分析复杂食品基质中痕量级的目标农药时非常耐用和快速。与固相萃取（SPE）相比，QuEChERS方法会带来更多的基质干扰，因为它是一种“刚好够用”的样品制备技术。因此，需要高选择性的仪器，如使用带DMRM检测模式的LC/MS/MS对兽药进行简便准确的分析。采用本文描述的LC/MS/MS方法，动物源食品中的36种兽药可以在9min内实现有效的分离。本法联用快速QuEChERS萃取，减少了大量操作步骤和分析人员的时间，为常规工作中兽药的筛查提供了一个可靠的方法。实验部分试剂与标准品所有试剂和溶剂均为HPLC级或者分析纯。甲醇（MeOH）和乙腈（ACN）购自Honeywell公司（马斯基根，密歇根州，美国）。甲酸（FA）和乙酸购自Sigma-Aldrich公司（圣路易斯，密苏里州，美国）。溶液和标准溶液将1mL甲酸加入100mLACN中，混匀，制备1%甲酸ACN溶液，每天新鲜配制。将1mL乙酸加入100mLACN中，混匀，制备1%乙酸ACN溶液，每天新鲜配制。标准溶液制备的浓度为10µg/mL（磺胺类和大环内酯类）、5µg/mL（氯吡多）和1µg/mL（喹诺酮类）。仪器与材料配备二极管阵列检测器的Agilent1260HPLC（安捷伦科技有限公司，加利福尼亚州，美国）。带有AJST电喷雾离子源的Agilent6460三重四极杆液质联用系统（安捷伦科技有限公司，加利福尼亚州，美国）。AgilentBondElutQuEChERS硫酸镁（部件号5982-8082）AgilentBondElut氯化钠（部件号5982-5750）AgilentBondElutPSA（部件号5982-8382或5982-5753）AgilentBondElutC18EC（部件号5982-1382或5982-5752）AgilentBondElutSAX（部件号12213042）AgilentBondElutNH2（部件号12213021）药物残留分析用AgilentBondElutd-SPE（部件号5982-4956）AgilentBondElutQuEChERS不带缓冲盐萃取试剂盒（部件号5982-5550）AgilentZORBAXSolventSaverHDEclipsePlusC18，3.0×100mm，1.8µm色谱柱（部件号959757-302）3仪器条件HPLC条件色谱柱：安捷伦ZORBAXSolventSaverHDEclipsePlusC18，3.0×100mm，1.8µm流速：0.5mL/min柱温：30°C进样量：5µL流动相：A：H2O0.1%甲酸B：ACN梯度程序：时间%A%B0.090100.590101.080204.075258.040609.059512.059512.1901015.09010MS条件极性：正极干燥气温度：300°C干燥气流量：7L/min雾化器压力：50psi毛细管电压：3000V鞘气温度：350°C鞘气流量：10L/min扫描模式：DMRM样品制备样品匀浆空白的猪肉、牛奶、蜂蜜和鸡蛋样品购自当地一家杂货店。样品洗净并剁碎（视需要），然后于-20°C保存。萃取取2克（±0.05g）各样品（视需要匀浆），置于50mL离心管中。向样品中加入200µL兽药标准溶液，使浓...
