专题37基因工程--及其安全性【高频考点解读】1
基因工程的诞生(Ⅰ)
基因工程的原理及技术(Ⅱ)
基因工程的应用(Ⅱ)
蛋白质工程(Ⅰ)
【热点题型】题型一基因工程例1、关于DNA重组技术基本工具的说法正确的是()A.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端B.细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切C.限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端D.天然的质粒就可以用来作为载体【提分秘籍】1“”——.分子手术刀限制性核酸内切酶(限制酶)(1)存在:主要存在于原核生物中
(2)特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子
(3)识别序列的特点:呈现碱基互补对称,无论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线,如图,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的
如(4)切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA——片段末端通常有两种形式黏性末端和平末端(如图所示)
当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端
2“”——.分子缝合针DNA连接酶种类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能特性只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来缝合两种末端,但连接平末端之间的效率较低相同点都缝合磷酸二酯键,如图3
“”——分子运输车载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存
②具有一个至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子
(3)其他载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒
【误区警示】1.切割质粒需使用限制酶1次,切割