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党支部制度(精华版)1.生物体内哪些机制保证了dna复制的保真性.dna聚合酶的校对作用;rna引物起始复制可减少复制错误;修复系统有多种机制(光修复、切除修复、错配修复、易错修复、sos修复)和酶。2.有一个被认为是mrna的核苷酸序列,长3000个碱基,你怎样才能;(1)证明此rna是mrna而不是trna或rrna(2)确定它是真核还是原核mrna.答。①使用oligodt,对这个rna做反转录,如果获得相应的cdna,那这个序列就是真核mrna,因为真核mrna的末端的具polya尾巴可以和oligodt互补。否则可能是trna,rrna或原核mrna。②在被侧序列的5'和3'端分别加上特异的寡聚接头并用rna酶连接,以5'端特异寡聚接头设计的引物及3'端特异接头序列扩增被测序列。测序并进行序列比对分析鉴定其是否有sd序列,如果具有sd序列则为原核mrna.3.真核生物组蛋白修饰有哪些。以目前的研究成果,在活跃转录的基因启动子区哪种组蛋白修饰最常见。真核生物组蛋白修饰有。甲基化、乙酰化、酰胺化,以及对应的去掉这些修饰的去乙酰化、去甲基化等。最常见的是乙酰化,乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷,降低了它与dna的亲和性,导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质相结合的变化,从而提高了基因转录的活性。4.说明真核生物表达调控的不同层次。并请说明最重要的调控环节(1)dna和染色体水平。基因重排、基因扩增、dna修饰、基因封闭、核小体的修饰(染色体结构)。(2)转录水平。包括转录起始、延伸的弱化、终止都会对mrna前体水平产生影响。(3)转录后水平。真核生物转录和翻译不偶联,转录出的mrna前提经加工才能成熟为翻译模板mrna,此过程包括剪切、修饰、编辑、5'和3'端的修饰及转运到翻译场所等。(4)翻译水平。包括核糖体的磷酸化/去磷酸化调节,第1页共9页poly(a)的调节,移码和通读等。(5)翻译后水平:包括翻译产物的剪切、修饰(如糖基化、磷酸化、切除信号肽、脂化及构象形成、转运和装配形成复合蛋白体)(6)mrna降解的调控,随生长发育和外界环境改变、细胞中蛋白质种类也在不断变化,原有mrna要降解并以新mrna代之,因此mrna是有一定寿命的,细胞中有控制mrna寿命的机制。转录水平的调控是重要的调控水平,真核生物在转录水平上的调节主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和rna聚合酶的相互作用来完成的。当反式作用因子和顺式元件结合后,将影响转录起始复合物的形成,从而影响转录的起始和效率。5.分别说出7中以上rna的功能(1)rna作为病毒基因组。在有些病毒中不含dna,而是以rna作为遗传信息的携带者。(2)rna在蛋白质生物合成中起重要作用。mrna起信使和模板的作用,trna起转运氨基酸和信息转换的作用,rrna起核糖体装配和催化的作用。(3)rna参与转录后加工、编辑和修饰。rna转录后加工、编辑和修饰依赖于各类小rna和其蛋白质复合物。(4)rna具有重要的催化功能和其它持家功能。(5)rna对基因表达和细胞功能具有重要调节作用,如rna干扰。(6)rna在生物进化中起重要。作用核酶可以自身切割、剪接,切割其它rna,合成肽键。(7)非编码rna是一类不编码蛋白质但具有功能的rna分子,它们在生物体重要生命活动中发挥着极广泛的调控作用。6.以乳糖操纵子为例画图说明原核基因的组织方式,操纵子的正调控和负调控。操纵子的基本组成(组织方式):结构基因群。乳糖操纵子含有lacz、lacy和laca3个结构基因。lacz基因编码β-半乳糖苷酶,将乳糖分解为半乳糖和葡萄糖;lacy基因编码半乳糖转移酶,使环境中的乳糖进入细胞内;laca编码半乳糖苷乙酰基转移酶,消除lacy对细胞造成第2页共9页的毒性。启动子区。操纵子至少有一个启动子,一般在第一个结构基因5'侧上游,控制整个结构基因群的转录。操纵区。部分序列与启动子序列重叠。阻遏蛋白与操纵区结合,就妨碍了rna聚合酶与启动子的结合及其后基因的转录起始,从而阻遏了lac基因的表达。laci基因:laci的产物称为lac阻遏蛋白,与操纵区结合后能减弱或阻止其调控的基因转录。cap位点:被camp活化的cap与cap位点结合,可以使得转录效率大幅提高。操纵子的正调控和负调控。laci基因在其自身的启动子pi控制下,低水平、组成性表达产生阻...

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