PCB技术简介(要素、历史、影响因素、应用以及污染和预防)VIP免费

何谓 PCR 简单的说，PCR 就是利用 DNA 聚合酶对特定基因做体外或试管内 (In Vitro) 的大量合成。基本上它是利用 DNA 聚合酶进行专一性的连锁复制.目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。 PCR 的要素 基本的 PCR 须具备１.要被复制的 DNA 模板 (Template) ２.界定复制范围两端的引物(Primers). ３.DNA 聚合酶 (Taq. Polymearse) 4.合成的原料及水。PCR 反应包括三个主要步骤，分别是 1). Denaturation 2). Annealing of primers, and 3). Extension of primers。 所谓 Denaturing 乃是将 DNA 加热变性， 将双股的 DNA 加热后转为单股 DNA 以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers 于一定的温度下附着于模板 DNA 两端。 最后在 DNA 聚合酶 (e.g. Taq-polymerase) 的作用下进行引物的延长 (Extension of primers)及另一股的合成。PCR 的历史 PCR 的发展可以说是从 DNA 合成酵素的发现缘起。DNA 合成酵素最早于 1955 年发现 (DNA polymerase I), 而较具有实验价值及可得性的 Klenow fragment of E. Coli 则是于 70年代的初期由 Dr. H. Klenow 所发现, 但由于这个酵素是一种易被热所破坏之酵素, 因此不符合一连串的高温连锁反应所需。现今所使用的酵素 (简称 Taq polymerase), 则是于1976 年从热泉 Hot spring 中的细菌(Thermus Aquaticus) 分离出来的。 它的特性就在于能耐高温，是一个很理想的酵素，但它被广泛运用则于 80 年代之后。PCR 的原始雏形概念是类似基因修复复制 (DNA repair replication)，它是于 1971 年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表第一个单纯且短暂性基因复制 (类似 PCR 前两个周期反应) 的实验。 而现今所发展出来的 PCR 则于 1983 由 Dr. Kary B. Mullis 发展出的，Dr. Mullis 当年服务于一家物科技研究公司 (Perkin- Elmer Cetus Corporation). 目前这家公司在 PCR 的相关仪器及原料上占有很大的巿场。Dr.Mullis 并于 1985 年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文。此后，PCR 的运用一日千里，相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。在 1989 年，Science 将 PCR 中的 DNA 合成酵素命名为当年的风云分子 (Molecule of the year)，而 PCR 本身则列为年度的重要科学发明产物。当然，它的原发明者更在往后获得诺贝尔...