过氧化氢酶 课题2 温度对酶活性的影响 课题概述： 生物体内的各项代谢，只有在酶的参与下才能迅速进行。酶的本质是蛋白质，其催化作用受温度等条件的影响。不同类酶均有其作用的最适温度，高于或低于该温度，酶的活性就会下降，直至完全遭到破坏。 双氧水对大多数生物体有害，而许多生物体内都有过氧化氢酶等来分解它。 H2O2 —————→ H2O+ O2 本实验将以酵母菌为过氧化氢酶来源，利用氧气浓度传感器来测定不同温度下该反应的速度，从而确定过氧化氢酶发挥作用的最适温度。 氧气浓度传感器可测定气体中 0-27%范围的氧气的浓度。其核心装置是一原电池，氧气分子进入其中被还原而引起电流变化，即氧气浓度决定了电流变化的大小，进而改变输出电压的大小。因此通过对输出电压的测定即可确定气体中氧气的浓度。 目的： 1．学会氧气浓度传感器的使用方法。 2．学会测定不同温度下酶促反应的速率，并对各速率进行比较。 器材： 实验材料：市售干酵母。 实验仪器及用品：TI—83 Plus 图形计算器及 CBL 系统、氧气浓度传感器(附配套塑料瓶)、玻璃棒、温度计、100mL 小烧杯、50mL 量筒、小试管、刻度移液管、胶头滴管、保温杯、蒸馏水洗瓶、冰、冷水、热水、吸水纸。 实验试剂：3% H2O2溶液、2%葡萄糖。 步骤： 一．实验准备 1．水浴准备：保温杯(或两个烧杯间填充泡沫塑料代替之)中盛放一定量冰水或热水，分别调至0—5℃、20—25℃、30—35℃、35—40℃。实验期间温度计始终要悬在水中，监测温度。如有变化，及时调整。 2．称取0.5g 干酵母溶解在25mL2%葡萄糖溶液中，搅拌均匀。取4 支小试管，各加入1mL 上述悬浊液，分别置于各温度水浴中5—10 分钟。 二．设置传感器 1．连接 TI—83 Plus 图形计算器、CBL 系统。 2．将氧气浓度传感器与 CBL 系统 CH1 通道相连。 3．打开 TI—83 Plus 图形计算器、CBL 系统，按 APPS，选择“CHEMBIO”程序，按 ENTER。(见图 1、2) 图 1 图 2 4．在“MAIN MENU”菜单中选择“1：SET UP PROBES”；输入传感器数量“1”，按 ENTER。(见图 3) 5．在“SELECT PROBE”菜单中选择选择“7：MORE PROBES”，直至出现氧气浓度传感器。 6．在“SELECT PROBE”菜单中选择“4：OXYGEN SENSOR”。 (见图 4) 图 3 图 4 7．输入通道序号“1”；在“CALIBRATION”菜单中选择“1：USE STORE”。(见图 5、6) 图 5 图 6 8．在“OXYGEN UNITS”菜单中...
