细菌的保存方法 1
细菌保存于穿刺培养物中：一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年
具体方法如下：用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落，针缓慢穿过琼脂到达瓶底，连续几次，盖上瓶盖拧紧，做好标记
室温下存放于暗处
（最好一点可以将瓶盖放松，在适当温度下培养过夜，再拧紧瓶盖并加封 Parafilm 膜，室温或最好在 4度避光保存）
细菌保存于含有甘油的培养物中： （1）：在液体培养基中生长的细菌培养物：取 0
85ml 细菌培养物，加入 0
15ml 高压灭菌甘油，振荡培养物使甘油分布均匀，然后转移到标记好的保存管内，密封，在乙醇－干冰或液氮中冻结后再转至－70 度长期保存
在复苏时，用灭菌接种针刮取冻结的培养物表面，然后立即把黏附于接种针上的细菌划于含适当抗生素的 LB 琼脂平板表面，于 37 度过夜
（2）：在琼脂平板上生长的细菌培养物：从琼脂平板表面刮下细菌放入装有 2mlLB 的无菌试管内，再加入等量的含有 30％灭菌甘油的 LB 培养基，振荡使甘油完全分布均匀后，分装于无菌保存管内，密封，再按前述方法冰冻保存
这一方法的优点在于可用于保存在质粒载体上建立的cDNA 文库
菌种保存方法 微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的
保藏方法大致可分为以下几种： 1 ．传代培养保藏法 又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于 4 —6 ℃冰箱内保存
2 ．液体石蜡覆盖保藏法 是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止
