第一章 细胞生物学绪论 细胞生物学概念：是从细胞的显微、亚显微和分子三个水平对细胞的各种生命活动开展研究的科学。 细胞生物学的研究对象：以细胞为研究对象。 细胞生物学的研究方式：①从细胞的表型特征入手，探索隐藏在其背后的分子机制②从基因或蛋白质等生物大分子入手，了解其对细胞功能或行为的影响。故而细胞生物学也被称为细胞分子生物学或分子细胞生物学。 细胞生物学发展的几个主要阶段：①细胞的发现与细胞学说的创立②光学显微镜下的细胞学研究③实验细胞学阶段④亚显微结构域分子水平的细胞生物学 细胞学说： ①‘一切生物，从单细胞生物到高等动物和植物均由细胞组成，细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位。’②‘一切细胞只能来自原来的细胞。’ 第三章 细胞生物学的研究方法 光学显微镜分辨率及公式： ①显微镜或人眼在 25cm 的眀视距离处，能分辨被检物体微细结构最小间隔的距离，普通光学显微镜的分辨极限是 0.2μm ②分辨率公式：R=0.61λ／n .sin n=聚光镜和物镜之间介质的折射率，空气为 1，油为 1.5 =标本对物镜镜口张角的半角，sin 的最大值为 1 λ=照明光源的波长，白光 0.5μm 生物样品制备的过程： ①固定：可使生物大分子交联，蛋白质成分凝固，防止细胞自溶和破坏而产生人工假象。常用固定剂：甲醛、戊二醛、乙醇 ②包埋：使组织形成硬块，防止样品移位，便于切片。常用包埋剂：石蜡、树脂 ③切片：切成 1～10μm 的薄片 ④选择性染色：增大反差 荧光：细胞中的某些物质（如叶绿素）经紫外线照射后能发出可见光线，称为荧光。 自发荧光：由细胞本身存在的物质经紫外线照射后发出的荧光。 诱发荧光：一些细胞成分本身经紫外线照射后不发荧光，但用荧光染料（酸性品红、甲基绿、吖叮橙等荧光色素）进行活体染色或固定后切片染色，就能在荧光镜下看见荧光，这种荧光叫诱发荧光。 共聚焦的概念：是指物镜和聚光镜互相共焦点，亦即两者同时聚焦到一个点，保证了只有从标本焦面出发的光线聚焦成像，焦面以外的漫射光不参加成像，大大提高了分辨率，使图像更加清晰。 透射电镜标本制备过程： ①取材:尽可能保持生活状态,避免损伤必须耐真空由于电子穿透力弱,标本必须超薄标本反差应尽可能大(生物材料原子系数低,图像反差差,不易出现明暗差别) ②固定:为防止生物样品在死亡后和脱水过程中产生结构改变,离体生物标本迅速固定。常用戊二醛和四氧化锇固定戊二醛在蛋白...
