WESTERN+液体配方v1VIP免费

WESTERN 液体配方v1.0 2005-11-8 [常用buffer] 1. PBS(1000ml PH7.4) KCl 0.2g KH2PO4 0.2g NaCl 8.0g Na2HPO4.2H2O 1.15g 加ddH2O 定容至1000ml 常温保存 2．1×DHank’s（1000ml PH7.0~7.2 ） KCl 0.4g NaCl 8.00g Na2HPO4.12H2O 0.156g KH2PO4 0.06g NaHCO3 0.35g (如需要可加酚红 0.02g) 加ddH2O至1000ml 4oC保存6 个月 10×DHank’s(500ml ) KCl 2.00g NaCl 4000g Na2HPO4.12H2O 0.779g KH2PO4 0.30g NaHCO3 1.75g 加ddH2O至500ml 4oC保存6 个月 3．TBS（1000ml PH 7.6） Tris base (121.1) 10mM 1.211g NaCl(58.44) 150mM 8.766g ddH2O 800ml 加浓盐酸约 10－17 滴 调 PH 至7.6,定容至1000ml 常温保存 4．TBST TBS 临用加0.05%Tw een20 4oC保存 15．电泳缓冲液 （1000ml PH8.3） K：SDS粉末很轻，称量时易被吸入口鼻腔内，非常难受，操作时最好带口罩眼镜防护。 s：甘氨酸、甲醇用量比较大，买大包装合算 Tris base 3.03g 甘氨酸 14.4g SDS 1g 定容至 1000ml 4oC保存 1 周 6．电转缓冲液（1000ml PH 8.3-8.4） Tris base 5.82g 甘氨酸 2.93g SDS 0.37g 甲醇 200ml 加ddH2O定容至 1000ml 4oC保存 1 周 2[备用液] 1. 30%丙稀酰胺储备液(100m l) 丙稀酰胺（acrylamide）有毒 29.0g N,N’-甲叉双丙稀酰胺（N,N’-methylenebisacrylamide）有毒 1.0g ddH2O 60ml 37oC溶解（有的配方需要溶解18hr以上），定容至100ml， 滤纸过滤 棕色瓶 4oC保存一个月（实践表明常温保存2～3 个月亦可） 2.分离胶缓冲液1.5M Tris.HCl 缓冲液 PH8.8(100ml) Tris base 18.17g ddH2O 80ml 搅拌混匀后，加入浓盐酸约3.5ml，调PH 至8.8,定容至100ml 4oC保存 3．浓缩胶缓冲液1M Tris.HCl 缓冲液 PH6.8(100ml) Tris base 12.11g ddH2O 70ml 搅拌混匀后，加入浓盐酸约7ml，调PH 至6.8,定容至100ml 4oC保存 4．10％SDS 溶液（100ml） SDS(十二烷基黄酸钠) 10g ddH2O 80ml 68oC助溶，定容至100ml 常温保存 5．2×SDS 上样缓冲液（loading buffer） s：用2-ME 更省钱 0.5M Tris.HCl PH6.8 2.5ml SDS 0.4g DTT 或 2-ME（β 巯基乙醇） 0.31g/0.2ml 甘油 2ml 溴酚蓝 0.1mg 加ddH2O 定容至10ml 分装 1ml，100μl/支，-20oC保存 6.5×SDS 上样缓冲液（loading buffer） 1M Tris.HCl...