实验 1 神经的电生理特性及影响因素实验【目的】探讨神经干双相动作电位的形成机制及影响因素
1 材料蟾蜍;任氏液;BB-3G 标本屏蔽盒,微机生物信号采集处理系统
2 方法2.1 系统连接和参数设置系统连接按图1-1 所示连接生物信号采集处理系统与标本盒
启动 RM6240 系统软件,设置仪器参数:( 1)RM6240 系统:点击 “实验 ”菜单,选择 “神经干动作电位”项目
仪器参数:1、2 通道时间常数0
02s、滤波频率3KHz 、灵敏度 5mV ,采样频率100KHz ,扫描速度0
2ms/div
单刺激激模式,刺激波宽0
1ms,延迟 1ms,同步触发(图1-2)
2.2 制备蟾蜍坐骨神经干标本2.2.1 毁脑脊髓取蟾蜍一只,用左手握住,以食指压其头部前端使其尽量前俯,右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入,到达椎管,即将探针改变方向刺入颅腔,向各侧不断搅动,彻底捣毁脑组织;再将探针原路退出,刺向尾侧,捻动探针使逐渐刺入整个椎管内,捣毁脊髓
此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失,四肢松软,即成为一毁脑脊髓的蟾蜍(pithed toad)
否则须按上法再行捣毁
2.2.2 下肢标本制备用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱
左手握住蟾蜍脊柱,右手将粗剪刀沿两侧(避开坐骨神经)剪开腹壁
此时躯干上部及内脏即全部下垂
剪除全部躯干上部及内脏组织,弃于瓷盆内
避开神经,用右手拇指和食指夹住脊柱,左手捏住皮肤边缘,逐步向下牵拉剥离皮肤拉至大腿时,如阻力较大,可先剥下一侧,再剥另一侧
将全部皮肤剥除后,将标本置于盛有任氏液的培养皿中
2.2.3 分离神经干剥皮的下肢标本俯卧位置于蛙板上,用尖头镊子夹住骶骨尾端稍向上提, 使骶部向上隆起,用粗剪刀水平位剪除骶骨
标本仰卧置于蛙板上,用玻璃分针分离脊柱两侧的坐骨神经,穿线,紧靠脊柱根部结扎,近中枢端剪断神经干,用尖头镊子夹结扎线将神经干从骶部剪口处穿出