临八12 室女座出品 生物化学与分子生物学 一、蛋白质的结构与功能 1.凯氏定氮法:由于体内的含氮物质以蛋白质为主,各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%,只要测定生物样品中的含氮量,就可推算出蛋白质的大致含量: 100 克样品中蛋白质的含量 (g %) = 每克样品含氮克数 × 6.25 × 100 2.蛋白质的生物学重要性(一广三多):分布广、种类多、含量多、功能多。 3.组成人体蛋白质的20 种氨基酸均属于L——氨基酸(Gly 除外)。硒代半胱氨酸在某些情况下也可用于合成蛋白质。 注:将氨基酸含C 基团置于竖线上,H 原子位于竖线右侧的为L 型 4.20 种L——氨基酸分类及其缩写、符号。 (1)非极性脂肪族氨基酸:侧链为非极性的疏水基团,水中溶解度小,等电点近中性 (2)极性中性氨基酸:侧链基团有极性,水中溶解度大,等电点近中性 (3)芳香族氨基酸:侧链含有苯环 (4)酸性氨基酸:侧链含有两个羧基,等电点低 (5)碱性氨基酸:侧链含有氨基,胍基或咪唑基,等电点高 5.脯氨酸是一种α— 亚氨基酸,可以看成是 α—氨基酸的侧链取代了自身氨基上的一个氢原子 6.半胱氨酸的巯基失去质子的倾向性较其他氨基酸大,而两个半胱氨酸巯基之间可脱氢形成二硫键 7.必需氨基酸:“甲(Met)撷(Val)来(Lys)一(Ile)本(Phe)亮(Lue)色(Trp)书(Thr)”;条件必需氨基酸:Cys、Tyr;儿童必需氨基酸:Arg、His 8.在某一pH 的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,呈电中性。此时溶液的pH 值称为该氨基酸的等电点(pI)。pI = (pK1+ pK2 )/2 9.酸性氨基酸的等电点取两羧基的pK 值的平均值 ;碱性氨基酸的等电点取两氨基的pK值的平均值 。 10.含有共轭双键的色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基,所以测定蛋白质溶液 280nm 的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。 11.氨基酸与茚三酮水合物共热,可生成蓝紫色化合物,其最大吸收峰在 570nm 处,而且吸收峰值与氨基酸释放出的氨量成正比,作为氨基酸定量分析方法。 12. 蛋白质分子结构 定义 主要化学键 一级结构 蛋白质分子从 N-端至 C-端的氨基酸排列顺序 肽键、二硫键 二级结构 蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,亦即肽链主链骨架原子的相对空间位置 氢键 三级结构 (肌红蛋白) 整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置 疏水键、盐键、...