第三章固定化酶与固定化细胞VIP专享

 第三章 固定化酶与固定化细胞  第一节 概述  第二节 固定化酶的性质及其影响因素  第三节 固定化酶的制备  第四节 固定化细胞  第五节 固定化辅酶和原生质体  第六节 酶反应器和固定化酶（细胞）的应用  第一节 概述  什么是固定化酶？  第一节 概述 二． 固定化酶的优缺点  多次使用  可以装塔连续反应  优点： 纯化简单  提高产物质量  应用范围广  缺点： 首次投入成本高  大分子底物较困难  第一节结束  点击返回  第二节 固定化酶的性质及其影响因素  一． 影响固定化酶性质的因素  二． 固定化后酶性质的变化  三． 评价固定化酶的指标  一． 影响固定化酶性质的因素 1． 酶本身的变化，主要是由于活性中心的氨基酸残基、高级结构和电荷状态等发生了变化。  二．固定化后酶性质的变化  1． 固定化对酶活性的影响：  酶活性下降，反应速度下降 2． 固定化对酶稳定性的影响  稳定性提高（原因）  3． pH 的变化（原因）  载体带负电荷，pH 向碱性方向移动。  载体带正电荷，pH 向酸性方向移动。  催化反应的产物为酸性时，固定化酶的pH 值比游离  酶的pH 值高；反之则低  固定化后酶稳定性提高的原因：  a. 固定化后酶分子与载体多点连接。  b. 酶活力的释放是缓慢的。  c. 抑制自身降解，提高了酶稳定性。  PH 对酶活性的影响：  （1） 改变酶的空间构象  （2）影响酶的催化基团的解离  （3）影响酶的结合基团的解离  （4）改变底物的解离状态，酶与底物不能结合或结合后不能生成产物。  4． 最适温度变化 一般与游离酶差不多，但有些会有较明显的变化。 5． 底物特异性变化  作用于低分子底物的酶 特异性没有明显变化  既可作用于低分子底物又可作用于大分子低物的酶  特异性往往会变化。 6． 米氏常数Km 的变化，Km 值随载体性质变化 （链接）  米氏常数Km 的变化，Km 值随载体性质变化 由于分配效应：ρ =[Si]微环境/[S]宏观环境 Km'=Km/ρ (表观米氏常数)  （1） 载体与底物带相同电荷，Si]<[S],ρ <1,Km’>Km 固定化酶降低了酶的亲和力。  （2） 载体与底物电荷相反，静电作用，[Si]>[S]，则ρ >1,Km'