1 《生物制药技术》实验指导 实验一 金霉素链霉菌培养基的制备(验证型) 实验目的: 1、学会培养基的配制 2、掌握灭菌方法。 实验原理: 金 霉 素 链 霉 菌 ( Streptomyces aureofaciens ) 亦 称 “ 金 色 链 霉 菌 ” , 放 线 菌 门(Actinobacteria) , 放 线 菌 纲 (Actinobacteria) , 放 线 菌 目 (Actinomy cetales) , 链 霉 菌 科(Streptomy cetaceae),链霉菌属(Streptomy ces)。在固体培养基上产生金色色素,故名。其菌落为草帽型, 菌落直径一般为 3~5 毫米, 表面较平坦, 中间有隆起。菌落开始为白色,长孢子后变青色。在显微镜下可以看到短杆状的菌丝。抗菌素工业上用以生产金霉素。 放线菌是一类介于细菌与真菌之间的单细胞微生物。放线菌在土壤中分布最多,大多数生活在含水量较低、有机质丰富和微碱性的土壤中。多数情况下,泥土中散发出的“泥腥味”就是由放线菌中链霉菌产生的土腥素造成的。放线菌大都好氧,属于化能异养,菌丝纤细,分枝,常从一个中心向周围辐射生长。因其生长具辐射状,故名放线菌。放线菌能像真菌那样形成分枝菌丝,并在菌丝末端产生外生的分生孢子,有些种类甚至形成孢子囊,因而曾被误认是真菌。但其菌落较小而致密,不易挑取。不少菌种在医药、农业和工业上广泛应用,可产生抗菌素,现已发现和分离出的由放线菌产生的抗生素多达4 000多种,其中,有50多种抗生素已经广泛地得到应用,如链霉素、红霉素、土霉素、四环素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于临床治疗人的多种疾病;有些可生产蛋白酶、葡萄糖异构酶;有的用于农业生产,如灭瘟素、井冈霉素、庆丰霉素等。 四环素类抗生素是由链霉菌生产或经半合成制取的一类广谱抗生素。抗菌谱极广,包括革兰氏阳性和阴性菌、立克次体、衣原体、支原体和螺旋体。品种主要包括金霉素、四环素和土霉素。 器材: 1ml 移液枪;铝锅;电炉 试剂: NaBr 母液(100 g/L) KCl 母液(100 g/L) M-促进剂母液(2.5 g/L) 实验步骤: 1.种子培养基 种子培养基(g/L):可溶性淀粉40,黄豆饼粉20,酵母粉5,蛋白胨5,CaCO3 4, (NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,KH2PO4 0.25。 先称取黄豆饼粉20g,单独煮沸 10 分钟,加入少量凉水降温,4 层纱布压榨取汁,与其它称好的各成分混合,定容至1L。 每 50ml 分装到 250ml 三角瓶中,每组 2 瓶。 2.定向发酵培养基 2 发酵培养...