精品文档---下载后可任意编辑HIF-2α 在低氧微环境下对结肠癌 C-Myc 癌基因调控讨论中期报告本讨论旨在探讨在低氧微环境下，HIF-2α 对结肠癌中 C-Myc 癌基因的调控作用，并进一步讨论其机制。目前已完成以下工作：1.建立结肠癌细胞系 HCT116 和 SW480 的低氧微环境模型：利用 CO2+O2 气体调节仪，设定不同含氧量的培育条件，成功建立了低氧微环境模型。通过细胞生长曲线、MTT、流式细胞术等技术，确定了两种细胞系在低氧微环境下的最适生长条件。2.分析 HIF-2α 与 C-Myc 在低氧微环境下的表达变化：通过 Western blot 和实时荧光定量 PCR 技术，测定了 HCT116 和SW480 细胞在低氧微环境下 HIF-2α 和 C-Myc 的表达水平。结果表明，HIF-2α 的表达水平随着氧含量的降低逐渐上升，而 C-Myc 的表达水平则出现了明显的上调。3.进一步讨论 HIF-2α 对 C-Myc 表达调控的机制：采纳 RNA 干扰技术，沉默 HIF-2α 基因后，再测定 C-Myc 的表达水平，结果发现 HIF-2α 对 C-Myc 的调控作用主要通过影响 C-Myc 的转录水平实现。并且，进一步的 ChIP 实验表明，HIF-2α 通过直接结合 C-Myc 基因的启动子区域，并促进其转录活性，从而影响结肠癌细胞的增殖和转移。 总体来说，以上讨论结果表明，HIF-2α 在低氧微环境下能够调控结肠癌 C-Myc 癌基因的表达，并且其作用机制较为复杂，既涉及到基因的转录调控，也涉及到直接影响基因的转录活性等方面。您对以上讨论进展有什么问题或建议吗？
