精品文档---下载后可任意编辑乙型脑炎病毒 EDⅢ 蛋白单克隆抗体的制备及鉴定的开题报告一、选题背景及意义：乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的急性传染病，常见于夏秋季节。我国是乙型脑炎流行区，每年多地有发病或死亡报告。乙型脑炎病毒EDⅢ 蛋白作为病毒的主要抗原，是疫苗中重要的抗原成分，因此其制备和鉴定显得尤为重要。二、讨论目的：本讨论旨在制备乙型脑炎病毒 EDⅢ 蛋白单克隆抗体，为病毒的诊断和疫苗研制提供重要的实验依据和技术支持。三、讨论方法：（1）病毒培育选择经典的乙型脑炎病毒作为实验对象，采纳 Vero 细胞进行病毒培育，获得足够的病毒量作为抗原。（2）EDⅢ 蛋白表达和纯化采纳重组 DNA 技术，构建 EDⅢ 蛋白表达载体，转染到 CHO 细胞中，利用 Western blot 对细胞培育上清进行检测和鉴定，通过 His-tag 纯化技术纯化 EDⅢ 蛋白。（3）小鼠免疫和单克隆抗体制备将纯化后的 EDⅢ 蛋白作为免疫原，注射小鼠进行免疫，根据抗体水平选择高水平小鼠提取脾细胞进行细胞融合，构建杂交瘤。经过三次克隆筛选后，获得单克隆抗体。（4）单克隆抗体鉴定采纳 ELISA、Western blot 等技术对制备的单克隆抗体进行鉴定，确定其免疫活性和特异性。四、预期结果：本讨论预期能够成功制备乙型脑炎病毒 EDⅢ 蛋白单克隆抗体，该抗体具有高度特异性和敏感性，可用于病毒的诊断和疫苗的研制。五、实验进度：精品文档---下载后可任意编辑目前已完成乙型脑炎病毒的培育和 EDⅢ 蛋白的表达和纯化，正在进行小鼠免疫和单克隆抗体制备。估计明年 5 月完成全部实验内容和鉴定工作。
