精品文档---下载后可任意编辑云斑天牛触角全长 cDNA 文库的构建及化学感受蛋白基因的克隆的开题报告一、讨论背景云斑天牛（Anoplophora glabripennis）是一种重要的林业害虫，其幼虫可侵蚀树干造成树木粗大枝枯死或枝干折断，引起林木经济损失严重。化感作用是天牛的重要途径之一，化感作用的主要途径为互惠共生菌介导的，而感知和适应宿主环境的能力是化感作用的前提条件之一，天牛触角作为其感知环境的重要器官，对其适应环境的能力至关重要。近年来，随着生物学讨论技术的不断进展，越来越多的讨论表明，化学感受蛋白（CSP）是昆虫触角中最重要的化学感受器官之一。二、讨论目的本讨论旨在构建云斑天牛触角全长 cDNA 文库，并利用该文库克隆天牛 CSP 基因，进一步讨论天牛触角感知和适应宿主环境的分子机制。三、讨论内容和方法1. 构建云斑天牛触角全长 cDNA 文库采纳 Trizol 法从云斑天牛感受器官组织中提取总 RNA，利用 Oligo（dT）探针作为引物，反转录合成 cDNA。将 cDNA 片段通过连接接头连接成双链 cDNA，后通过 PCR 扩增得到目的片段，将其克隆至载体中，生成云斑天牛触角全长 cDNA 文库。2. 克隆天牛化学感受蛋白基因根据已知昆虫 CSP 基因的保守序列设计引物，利用 PCR 扩增云斑天牛化学感受蛋白基因的片段，经过电泳检测、克隆、测序等步骤得到该基因的完整序列。四、预期结果和意义通过构建云斑天牛触角全长 cDNA 文库和克隆天牛 CSP 基因，可以为进一步讨论天牛触角感知和适应宿主环境的分子机制奠定基础，有助于开发新型的天敌对云斑天牛进行生物防治，减少天牛对林木造成的损害，进一步推动我国生物防治技术的进展。
