精品文档---下载后可任意编辑鸭瘟病毒 UL35 基因的原核表达、蛋白纯化、转录时相、表达时相及亚细胞定位的开题报告一、讨论背景及意义:鸭瘟是由鸭瘟病病毒(Duck Plague Virus,DPV)引起的一种急性、进展性、常常致死性的传染病。DPV 是病毒学家学到的一类由病毒的总代表细胞壳属病毒(Herpesviridae)所属的鸭瘟病病毒(Duck Plague Virus)所引起的一种疾病,亦称水禽细胞壳病毒病(Waterfowl herpesvirus disease)或度鸭疫(Deyan disease)。DPV 病毒属于一类荷状 DNA 病毒,具有较大的基因组大小,包括 80 种或更多的基因,其中 UL35 基因已知与 DPV 的病毒感染、增殖等过程密切相关。因此,鸭瘟病毒 UL35 基因的讨论具有重要的科学和有用价值。二、讨论内容和方法:(1)讨论内容:本讨论的主要目的是开展鸭瘟病毒 UL35 基因的原核表达、蛋白纯化、转录时相、表达时相及亚细胞定位等方面的讨论,探讨该基因在鸭瘟病毒感染、增殖等过程中的作用机制。(2)讨论方法:本讨论计划利用分子克隆技术将鸭瘟病毒 UL35 基因克隆到原核表达载体中,将其转化到大肠杆菌 DH5α 中,通过 IPTG 诱导表达,批量生产表达蛋白。利用 Ni2+亲和层析技术进行蛋白纯化,根据蛋白电泳和Western blot 实验来确定蛋白表达和纯度。利用 qRT-PCR 技术、西方印迹等方法来讨论 UL35 基因的转录和表达时相。利用免疫荧光技术和电子显微镜技术来讨论 UL35 基因的亚细胞定位。三、预期成果及意义:本讨论估计能够原核表达和纯化出鸭瘟病毒 UL35 基因蛋白,明确UL35 基因在病毒感染、增殖等过程中的作用机制,从而为讨论和控制鸭瘟病毒感染提供理论和技术支持。同时,本讨论还将为鸭瘟病毒等相关疾病的防控和治疗提供参考。