杭州余杭邦尔医院- 1 - 丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定方法操作规程 【产品名称】通用名称:丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(IFCC 法) 【预期用途】该试剂盒采用IFCC 法,用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。 【检验原理】在ALT 催化下,从丙氨酸转移到2 个氨基到α-酮戊二酸上,生成产物谷氨酸和丙酮酸。后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸,在340nm 波长条件下检测到NADH 吸光度下降速率,与 ALT 的活力成比例。 L-丙氨酸+α-酮戊二酸 ALT 丙酮酸+ L-谷氨酸 丙酮酸+NADH+H+ LDH L-乳酸+NAD++H2O 【主要组成成份】 R1: Tris 缓冲液 150mmol/L L-丙氨酸 750 mmol/L 乳酸脱氢酶(LDH) 1200U/L NADH 0.4mmol/L R2: α-酮戊二酸 90mmol/L NADH 0.9mmol/L * 不同批号试剂盒各组分请勿混用。 【储存条件与有效期】 未开启的试剂盒在 2℃~8℃保存有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定28 天。试剂不可冰冻。 【适用仪器】 迈瑞BS 系列全自动生化分析仪、日立7180 型全自动生化分析仪、日立7060 型全自动生化分析仪、日立7600P 自动生化分析仪、奥林巴斯AU400 型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700 型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680 型全自动生化分析仪。若需 自动生化分析仪应用参 数 ,请随 时 和公 司 联 系。建 议 用户 在不同仪器上使 用本 产品时 ,根 据 实 验室 情 况进 行 验证 。 【样 本 要求 】 新 鲜 血清或肝素血浆样 本 ,采集 后及 时 测定,应避免 污 染 。 【检验方法】 试剂准 备 R1:即 用液体试剂 R2:即 用液体试剂 测定条件 波长 340nm 温 度 37℃ 分析类 型 动力学 法 反 应方向 下降反 应 操作步 骤 空 白 /校 准 /样 本 10ul R1 200ul 混匀 ,37℃孵 育 5min; R2 50ul 混匀 ,37℃孵 育 1min 后,连 续 测定3min 内 的吸光度,计 算 吸光度变化率(ΔA/min)。 * ΔA/min=ΔA/min 样 本 管 — ΔA/min 空 白 管 * 试剂和样 本 量可根 据 不同生化分析仪要求 按 比例适当 增 减 。 校 准 校 准 品类 型 杭 州 余 杭 邦 尔 医 院 - 2 - S1: 生 理 盐 水 S2: 迈 瑞 配 套 校 准 品 推 荐 进 行 2 点 线 性 校 准 校 准 周 期 和 要 求 ( 包 ...