肌酸激酶同工酶——MB评估

肌酸激酶同工酶——M B 评估 上海仁济医院检验科 肌酸激酶MB 同工酶（CK-MB）是由 M 和 B 亚基构成的杂化型二聚体，主要存在于心肌细胞的外浆层，是心肌酶谱中最有特异性的酶，从 80 年代起公认为心肌酶学诊断的“金标准”，应用于急性心肌梗塞（AMI）的早期诊断[1，2]1979 年 Gerhardt[3]等人首次报道用免疫抑制原理测定 CK 同工酶，免疫抑制法以其快速、灵敏、定量且可进行自动分析等优点适合常规检测，随着方法与试剂不断改进与完善，1986 年国外已有试剂盒供应，但价格昂贵；最近国内研制成功免疫抑制法测 CK-MB 的试剂盒，本文旨在对该试剂盒的特性作一评估。 材料和方法 一、标本来源 分正常组，AMI 组和非 AMI 组，非常人血清来自体检健康人员，计 30 例，AMI组 53 例，系仁济医院心内科病房已确诊为 AMI 者，非 AMI 组系心内科及其它科门诊病人，因胸痛、心率失常等初诊疑拟 AMI，后经系列观察和酶学检查证实不是 AMI 患者，共 20 例。 血标本留取后及时分离血清检测或将检测血清置于-20 度冰箱保存至测定。 二、试剂 1. 免疫抑制法检测 CK-MB 试剂盒：上海北加生化试剂有限公司产品 （1） R1：含 CK-MB 抗体的咪唑缓冲液 （羊抗人 CK-M 多克隆抗体抑制剂>2000U/L，100mmol/L 的咪唑缓冲液成pH6.7 内含葡萄糖 20mmol/L，醋酸镁 10mmol/L，EDTA 2mmol/L） （2） R2(A)：酶干粉。 （AMP 5mmol/L，磷酸肌酸 30mmol/L，五磷酸二腺苷 10mmol/L，NADP 2mmol/L，V-乙腺半胱氨酸 20mmol/L，已糖激酶≥2500U/L，G6PDH≥500U/L，ADP 2mmol/L）。 2. 宝灵曼CK-MB 试剂盒：对照用。 三、仪器 HITACHI 7150 型自动生化分析仪 波长=340nm 四、方法 本试验在日立 7150 生化自动分析仪器上测定，参数表如下： TEST ASSAY CODE SAMPLE VOLUME R1 VOLUME R2 VOLUME WAVELENGTH CALIB METHOD STD. (1) CONC. –POSZ. STD. (2) CONC. –POSZ. STD. (3) CONC. –POSZ. STD. (4) CONC. –POSZ. STD. (5) CONC. –POSZ. STD. (6) CONC. –POSZ. SD LIMIT DUPLICATE LIMIT SENSITIVITY LIMIT SENSITIVITY LIMIT ABS. LIMIT (INC/DEC) PROZONE LIMIT EXPECTED VALUE TECH LIMIT INSTRUMENT FACTOR [ CK-MB ] [ RATE - A ]:[ 45 ]-[ 50 ] [ 5 ][ 3 ] [ 240 ][ 100 ][ NO ] [60 ][ 20 ][ NO ] ...