大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的讨论进展摘要由于 DNA 重组技术和蛋白组技术的进展与成熟,外源基因表达技术备受关注。其在生物、食品、以及医学领域发挥着举足轻重的作用。以原核生物细胞及真核生物细胞作为表达系统,进行目的基因序列的表达以生产蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶制剂等是近年来发酵的新型领域。原核和真核表达系统是近年来讨论和应用最广泛和最成熟的外源基因表达系统。对近年来关于大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的讨论进展进行了综述。关键词大肠杆菌表达系统;酵母表达系统;表达载体;外源基因;宿主菌株KeywordE.colie 某 preionytem;Yeate 某 preionytem;E 某preionvector;E 某 ogenougene;Hotbacteria自 20 世纪七八十年代以来,由于分子生物学和蛋白组学的迅猛进展,各种外源基因表达的遗传操作技术日趋成熟[1]。其中,大肠杆菌等原核表达系统具有遗传背景讨论清楚、操作简单、生长繁殖快、成本低、产量高、表达产物纯化过程简单、产物稳定性好、不易污染以及应用范围广等优点,是最早进行讨论的外源基因表达系统,同时也得到了非常广泛的应用,取得了巨大的科研价值和经济效益[2-3]。酵母菌是一类单细胞真核微生物,尤其是对酿酒酵母的应用可以追溯到几千年以前。同时,随着科学技术的不断进展,酵母的生物学和遗传学背景也已经讨论得十分清楚。由于酵母菌具有生长旺盛、生长周期短等特性,近年来,在外源基因表达方面得到了深化讨论和广泛应用[4-5]。利用酵母系统表达外源基因时,既具有原核生物生长繁殖快、遗传操作简单的特点,又具有真核生物对外源蛋白进行翻译后修饰加工的能力。表达外源基因常用的酵母种类有酿酒酵母和甲基营养型酵母[6]。随着 DNA 技术的迅猛进展,利用大肠杆菌和酵母表达系统表达蛋白疫苗、核酸疫苗和生物酶制剂等新型领域,开始进入产业化阶段,但随之带来一系列问题。笔者对大肠杆菌表达系统和酵母表达系统的讨论进展进行了综述。1 大肠杆菌表达系统1.1 大肠杆菌表达载体大肠杆菌作为原核生物,因其具有培育条件简单、生长速度快、操作简单以及不易污染等特点而成为原核表达系统中占据优势的菌株。表达系统中最重要的元件是表达载体,表达载体应当具有表达量高、稳定性好、适用范围广等优点。表达载体主要包括启动子、表达阅读框、终止子、复制起点以及抗性筛选标记等重要元件[7-8]。近年来的讨论表明,在科研和工业上被广泛应用的大肠杆菌表达载体主要有 pGE 系列、pQE...