探讨中药复方黄芪颗粒对感染HCMV小鼠治疗作用

探讨中药复方黄芪颗粒对感染 HCMV小鼠治疗作用 摘要：目的应用人巨细胞病毒-核酸扩增反应探讨中药复方黄芪颗粒对感染 HCMV小鼠治疗作用。方法用小鼠尾静脉染毒法建立 HCMV 全身获得性感染模型，并用复方黄芪颗粒给小鼠灌胃治疗，然后应用HCMVPCR 反应测定其内脏 HCMVDNA 阳性率。结果复方黄芪颗粒， g/kg 组 HCMVDNA 阳性率明显低于模型组。结论 复方黄芪颗粒对感染 HCMV 小鼠有一定的治疗作用。 关键词：人巨细胞病毒-核酸扩增； 复方黄芪颗粒； 人巨细胞病毒； 人巨细胞病毒感染小鼠模型 人巨细胞病毒感染十分普遍。在妇产科，妊娠妇女孕早期原发 HCMV 感染可造成流产、早产、死胎、畸形，宫内生长迟缓、智力低下及听力损害等。目前，尚无对妊娠期HCMV 活动性感染安全有效的治疗方法。本讨论首次采纳小鼠尾静脉染毒法建立 HCMV全身获得性感染模型，并进行了复方黄芪颗粒对感染小鼠体内讨论，应用 HCMVPCR测定，证实黄芪颗粒组 HCMVDNA 阳性率明显低于模型组。现将本讨论结果报道如下。 1 材料 标本收集和处理 选取 60 只雄性小鼠，18～22 g，共分 6 组，每组 10 只，分别为复方黄芪颗粒大、中、小剂量组，阴性对比组，模型组和阳性对比组。均采纳小鼠尾静脉注射 HCMV10- 1，每只 ml, 阴性对比组注射%生理盐水，每只 ml，于染毒第 2天开始治疗。大剂量组 g/kg，中剂量组 g/kg，小剂量组 g/kg，阴性对比组及模型对比组均给蒸馏水，上述各组给药途径为灌胃，每天每只 ml，阳性对比组，实验结束时，取主要脏器做 HCMVPCR。 HCMV PCR 引物按文献［1］，由山东省医科院生物医学讨论中心合成并纯化，引物序列：上游引物为 5′- GATCC GACCC ATTGT CTAAG- 3′，下游引物为 5′- GGCAG CTATC GTGAC TGGGA- 3′。 2 实验方法 PCR 检测标本中 HCMV- DNA 片段，每次扩增均设标准阳性和阴性对比。PCR 体系 25 μl,其中含 10×PCR 缓冲液 μl， mmol・L- 1dNTP 21 μl,上下游混合物 μl，TaqDNA 聚合酶 1 μl，标本处理后取10 μl 提取物，无菌蒸馏水加至 25 μl，覆以 30 μl 无菌石蜡油。反应按 94℃ 1 min，56℃ 1 min,71℃ 1 min,40 个循环，最后于 72℃保温 10 min，扩增物经 2%琼脂电泳，溴乙淀染色，紫外灯下检测荧光条带，与阳性模板同一位置即为阳性。产物长度 151 bp。 3 结果 上述结果表明，黄芪颗粒组 HCMV- DNA 阳性率明显低于...