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探讨中药复方黄芪颗粒对感染HCMV小鼠治疗作用

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探讨中药复方黄芪颗粒对感染 HCMV小鼠治疗作用 摘要:目的应用人巨细胞病毒-核酸扩增反应探讨中药复方黄芪颗粒对感染 HCMV小鼠治疗作用。方法用小鼠尾静脉染毒法建立 HCMV 全身获得性感染模型,并用复方黄芪颗粒给小鼠灌胃治疗,然后应用HCMVPCR 反应测定其内脏 HCMVDNA 阳性率。结果复方黄芪颗粒, g/kg 组 HCMVDNA 阳性率明显低于模型组。结论 复方黄芪颗粒对感染 HCMV 小鼠有一定的治疗作用。 关键词:人巨细胞病毒-核酸扩增; 复方黄芪颗粒; 人巨细胞病毒; 人巨细胞病毒感染小鼠模型 人巨细胞病毒感染十分普遍。在妇产科,妊娠妇女孕早期原发 HCMV 感染可造成流产、早产、死胎、畸形,宫内生长迟缓、智力低下及听力损害等。目前,尚无对妊娠期HCMV 活动性感染安全有效的治疗方法。本讨论首次采纳小鼠尾静脉染毒法建立 HCMV全身获得性感染模型,并进行了复方黄芪颗粒对感染小鼠体内讨论,应用 HCMVPCR测定,证实黄芪颗粒组 HCMVDNA 阳性率明显低于模型组。现将本讨论结果报道如下。 1 材料 标本收集和处理 选取 60 只雄性小鼠,18~22 g,共分 6 组,每组 10 只,分别为复方黄芪颗粒大、中、小剂量组,阴性对比组,模型组和阳性对比组。均采纳小鼠尾静脉注射 HCMV10- 1,每只 ml, 阴性对比组注射%生理盐水,每只 ml,于染毒第 2天开始治疗。大剂量组 g/kg,中剂量组 g/kg,小剂量组 g/kg,阴性对比组及模型对比组均给蒸馏水,上述各组给药途径为灌胃,每天每只 ml,阳性对比组,实验结束时,取主要脏器做 HCMVPCR。 HCMV PCR 引物按文献[1],由山东省医科院生物医学讨论中心合成并纯化,引物序列:上游引物为 5′- GATCC GACCC ATTGT CTAAG- 3′,下游引物为 5′- GGCAG CTATC GTGAC TGGGA- 3′。 2 实验方法 PCR 检测标本中 HCMV- DNA 片段,每次扩增均设标准阳性和阴性对比。PCR 体系 25 μl,其中含 10×PCR 缓冲液 μl, mmol・L- 1dNTP 21 μl,上下游混合物 μl,TaqDNA 聚合酶 1 μl,标本处理后取10 μl 提取物,无菌蒸馏水加至 25 μl,覆以 30 μl 无菌石蜡油。反应按 94℃ 1 min,56℃ 1 min,71℃ 1 min,40 个循环,最后于 72℃保温 10 min,扩增物经 2%琼脂电泳,溴乙淀染色,紫外灯下检测荧光条带,与阳性模板同一位置即为阳性。产物长度 151 bp。 3 结果 上述结果表明,黄芪颗粒组 HCMV- DNA 阳性率明显低于...

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