动物细胞融合与单克隆抗体【考点要求:】1、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同2、理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。3、理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用【考点解析】1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性植物细胞的全能性用 纤 维 素 酶 、 果胶 酶 去 除 细 胞 壁后 诱 导 原 生 质 体融合离 心 、 电 刺激、振动、聚乙二醇( PEG )诱导 克 服 远 源 杂交 不 亲 和 ,获 得 杂 种 植株动物细胞融合细胞膜的流动性用 胰 蛋 白 酶 使 细胞 分 散 后 诱 导 细胞融合除应用植物细胞 杂 交 手 段外,还有用灭活病毒诱导制 备 单 克 隆抗体【例 1】动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是① 诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采纳的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④2、单克隆抗体的制备(1)单克隆抗体:一个 B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的 B 淋巴细胞,形成细胞群,其产生的抗体就是单克隆抗体。【例 2】下列哪—项属于克隆A.将鸡的某个 DNA 片段整合到小鼠的 DNA 分子中B.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D.将某肿瘤细胞在体外培育繁殖成一个细胞群体制备过程:第一步:将注射到小鼠体内进行免疫;第二步:从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的 细胞,与小鼠的 细胞在 ,或聚乙二醇的诱导下融合;第三步:在特定的 培育基中,筛选出 细胞;第四步:克隆化培育杂交瘤细胞,进行抗体检测,从中选择出的细胞群,继续培育;第五步:将该杂交瘤细胞在 条件下大规模培育或注射到小鼠内增殖,然后再从培育液或小鼠腹水中提取,分离纯化单克隆抗体;(2)产生抗体的细胞是:浆细胞产生单克隆抗体的细胞是:杂交瘤细胞(3)杂交瘤细胞的特点:既能无限增殖,又能分泌特异性抗体(4)第一次筛选是为了获得:杂交瘤细胞第二次筛选时为了获得:既能无限增殖,又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞(5)单克隆抗体的优点是:特异性强、灵敏度高、可大量制备(6)①单克隆抗体可以作为诊断试剂,准确识别各种抗原物质,与抗原的特异性结合具备准确、高效、简易、快速的特点。②单克隆抗体还可以用于治疗疾病和运载药物:主要用...