一、常用有以下方法:1 半 固 体 保 存 法 : 将 菌 落 穿 刺 接 种 在 半 固 体 中 , 4 度 存 放 , 一 般 可 以 管 3 - 6 月2 低 温 冻 存 法 : 接 种 菌 落 的 肉 汤 加 20 % 灭 菌 甘 油 , 置 - 20 或 - 70 度 , 可 存 放 一 年 以 上
3 真空冻干法:试最理想的保存方法,但需要特别仪器
二、我一般用甘油管保村法和冻干粉保存法基因工程菌: 1:30%的灭菌甘油与培育好的菌悬液根据 1:1 的比例混合,分装到 1
5ML 的离心管中,每关1ML,存于--20 度,但仅保存半年就不太好了,最好保存到——70 度的低温冰箱中
也可用 10%的灭菌甘油从斜面上洗下保存
2:菌悬液中加甘露醇和人血白蛋白三、我们实验室保存菌种的方法是:1 将菌落穿刺接种在半固体中,如加有琼脂的肉汤培育基,4 度存放,保存时间较短一般 3-4月2 接种菌落的肉汤 0
9ml 加 100%灭菌甘油 0
1ml,置-20 度冰箱中可以保存一年左右,-70 度冰箱或液氮中可放置 N 年,细胞的保存我们放了近十年,仍然复苏的很好3 基因工程菌的保存: 为防止基因工程菌质粒丢失或不稳定,保存菌种加入甘油的量应该不大于 10%,一般 0
9ml的菌液加 0
1ml80%高压灭菌甘油-70 度冰箱保存四、看见大家说了这么多的保存方法,我说一个我在实验室里自己用的方法:将菌用 LB 培育过夜(该加什么如抗生素等别忘了哈),取 14 毫升(这个得根据你的离心机来定夺了)3000 转离心,然后加 3-4 毫升菌种保存液(甘油的量不多,5%而已,你也可以再加大一点)重悬,就行了
再用封口胶封一下,然后放在-20 度里
我用这种方法保存的多种菌(包括基因工程菌),一年的时间里都还没有出过问题
值得一提的是,你保存用的菌种管最好是新的,而且煮过最好,这