一、常用有以下方法：1 半 固 体 保 存 法 ： 将 菌 落 穿 刺 接 种 在 半 固 体 中 ， 4 度 存 放 ， 一 般 可 以 管 3 － 6 月2 低 温 冻 存 法 ： 接 种 菌 落 的 肉 汤 加 20 ％ 灭 菌 甘 油 ， 置 － 20 或 － 70 度 ， 可 存 放 一 年 以 上 。3 真空冻干法：试最理想的保存方法，但需要特别仪器。二、我一般用甘油管保村法和冻干粉保存法基因工程菌： 1：30%的灭菌甘油与培育好的菌悬液根据 1：1 的比例混合，分装到 1.5ML 的离心管中，每关1ML，存于--20 度，但仅保存半年就不太好了，最好保存到——70 度的低温冰箱中。也可用 10%的灭菌甘油从斜面上洗下保存。 2：菌悬液中加甘露醇和人血白蛋白三、我们实验室保存菌种的方法是:1 将菌落穿刺接种在半固体中，如加有琼脂的肉汤培育基，4 度存放，保存时间较短一般 3－4月2 接种菌落的肉汤 0.9ml 加 100％灭菌甘油 0.1ml，置－20 度冰箱中可以保存一年左右,－70 度冰箱或液氮中可放置 N 年，细胞的保存我们放了近十年，仍然复苏的很好3 基因工程菌的保存： 为防止基因工程菌质粒丢失或不稳定，保存菌种加入甘油的量应该不大于 10%，一般 0.9ml的菌液加 0.1ml80％高压灭菌甘油－70 度冰箱保存四、看见大家说了这么多的保存方法，我说一个我在实验室里自己用的方法：将菌用 LB 培育过夜（该加什么如抗生素等别忘了哈），取 14 毫升（这个得根据你的离心机来定夺了）3000 转离心，然后加 3-4 毫升菌种保存液（甘油的量不多，5%而已，你也可以再加大一点）重悬，就行了。再用封口胶封一下，然后放在-20 度里。我用这种方法保存的多种菌（包括基因工程菌），一年的时间里都还没有出过问题。值得一提的是，你保存用的菌种管最好是新的，而且煮过最好，这样可以除去一些有机溶剂对菌的影响。五、对于一般的大肠杆菌等基因工程菌，我们室常用的方法是：1、取原种 100 微升，在 3ml 适当培育基（2*YT，LB 等），加好抗生素，37 度摇菌过夜；2、次日取 50%甘油（已高压）与培育的菌液按 1：1—比例混匀（专用的菌种冻存管），20 度保存。3、每次使用于冰上操作，动作要快。另外小量分装冻存，避开反复冻融影响细菌质量。六细菌保存于含有甘油的培育物中：1>：在液体培育基中生长的细菌培育物：取 0.85ml 细菌培育物，加入 0.15ml 高压灭菌甘油，振荡培育物使甘油分布均匀，...
