TCDD 对血管平滑肌细胞的影响及在血管内皮损伤修复中的作用目前我国已步入老龄化社会,随着老年人口的增加,我国脑血管病的发生率也越来越高。数据显示脑血管病已成为国内致死致残首位病因,故对脑血管病的发生进展机制及影响因素等进行讨论具有十分重要的意义。既往讨论显示脑血管病的发生进展与血管损害因素及血管修复因素之间的失衡相关,炎症因素以及血流动力学被认为在其中发挥着重要的作用。近些年来,环境因素与疾病的关系也越来越受到重视。TCDD 是一种危害极大的环境污染物,其分布广泛,来源多,毒性强,在大气及许多生物体内均被检测到。包括我国在内的很多国家都把控制 TCDD 排放摆在极其重要的位置。TCDD 性质相对稳定,不易降解,会随着食物链在生物体内不断积聚。其对生物体内 AhR 具有强亲和力,主要通过激活 AhR 在免疫、炎症、毒理及癌症等方面发挥作用,已被发现和多种疾病的发生相关。但目前关于 TCDD 与脑血管病的关系讨论不多。此前有讨论显示烟草中的烟雾可通过 AhR 参加炎症反应并在动脉瘤及动脉粥样硬化等疾病中发挥作用。既往讨论还显示,TCDD 等环境污染物可在多种细胞中影响 IL-1β 产生,而IL-1β 等炎性细胞因子被认为与动脉粥样硬化等心脑血管疾病的发生相关。我们推测 TCDD 可通过激活 AhR 对血管壁产生炎症反应影响血管壁损伤修复平衡从而对脑血管病的发生进展产生影响。本讨论的主要目的有:1、通过两种不同小鼠颈动脉损伤模型讨论 TCDD 对血管内皮损伤修复的影响;2、讨论 TCDD 对血管平滑肌细胞的影响及进行相关机制讨论。本讨论涉及的主要技术方法有:两种不同小鼠颈动脉损伤模型的建模,标本取材固定包埋切片,HE 及免疫组化染色,免疫荧光染色,实时定量 PCR,贴壁细胞培育传代,血管平滑肌细胞表型转化模型建立,CCK8 细胞活力检测,细胞迁移能力检测,酶联免疫吸附实验(ELISA),蛋白质免疫印迹实验(Western blotting),医学统计等。第一部分 TCDD 对小鼠颈动脉导丝损伤模型内皮损伤修复的影响目的:1.检测 TCDD 对小鼠颈动脉导丝损伤模型内皮损伤修复的影响。2.检测新生内膜中主要细胞类型及其中 IL-1β 等表达情况。方法:1.TCDD 急性给药:随机分为 TCDD 建模组、玉米油溶剂建模组、单纯建模组和假手术组。通过不同剂量 TCDD 提前腹腔注射,随后进行小鼠颈动脉导丝损伤模型的建立;2.TCDD 慢性给药:分为 1 月组和 2 月组;每组又进一步随机分为TCDD 建模组、玉米油溶剂建模组、单纯建模组和...
