ABO 血型正定型标准操作规程一.目的:法律规范 ABO 血型正反定型的操作
二.适用范围:适用于 ABO 血型正反定型
三.支持性文件:全国临床检验操作规程第二版
四.原理:根据红细胞上有或无 A 抗原或/和 B 抗原,将血型分为 A 型、B 型、AB 型及 O 型
可利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定 ABO 血型
所谓正定型,是用已知抗 A 和抗 B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A抗原或/和 B 抗原;五.仪器:离心机
六.试剂:1.抗 A、抗 B 分型血清;定期进行效价滴定,以保分型血清质量性能符合要求
抗 A:1∶128,抗 B:1∶128
七.样本要求:1.红细胞 可用针刺手指采血,并直接用生理盐水稀释制成 5%红细胞悬液; 也可静脉采血,用 1∶9 枸橼酸钠抗凝.
2.血清 取静脉血将血液沿管壁慢慢注入干燥试管中,待自然凝固后用玻璃 棒轻轻搅动血块,使之与试管壁分离
或置 37℃水浴 1 小时,使血块收缩离心分离血清
八.操作步骤:1.取干净小试管 3 支,分别标明抗A.抗B和抗 A+B,用滴管分别加抗A.抗 B 和抗 A+B 分型血清各 1 滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞悬液 1 滴,混合
2.另取干净小试管 3 支,分别标明 A、B 和 O 细胞;用滴管分别加入受检者血清 1 滴于试管底部,再分别以滴管加入 A、B 和 O 型 5%试剂红细胞悬液 1 滴,混合
3.用离心机以 1000r/min 离心 1 分钟;或 3400r/10 秒
4.将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象
如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查
5.观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于 A、B 亚型;类 B 或 cisAB 的发现
6.凝集强度推断标准: 4+=红细胞凝集成一大块,血清清