SDS—PAGE30%聚丙烯酰胺溶液-----30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide( 丙 烯 酰胺)290g29g1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】将 29 克丙烯酰胺和 1 克 N,N'-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为 60ml 温热(37℃左右)的去离子水中,充分搅拌溶解,补加水至终体积为 100ml
45µm 微孔滤膜过滤除菌和杂质,储于棕色瓶,4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存
严格核实 PH 不得超过 7
0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的
使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制
如有沉淀,可以过滤
【保存条件】4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存【注意事项】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具有累积性
称量丙烯酰胺和 N,N'—亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具
可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能含有少量未聚合材料
1MTris—HCL(pH6
8)(浓缩胶 buffer)【组分浓度】1MTris—HCL名称用量备注Tris12
1g去离子水80ml浓盐酸9ml(36%的浓盐酸)预实验已确定去离子水加入去离子水定容至 100ml 后,室温保存【配制方法】称量 121
1gTris 碱溶于 800mL 的去离子水,充分搅拌溶解,加〉0
7mL 的浓 HCL 调节所需要的 pH值(7
4—大约 0
6-大约 0
0-大约 0
42mL),将溶液定容至 1L,高温高压灭菌后,室温保存
应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值,因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的 pH 值大约降低 0