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SDS-PAGE所有详细试剂配方

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SDS—PAGE30%聚丙烯酰胺溶液-----30%(w/v)Acrylamide 【组分浓度】各种组分名称配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide( 丙 烯 酰胺)290g29g1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】将 29 克丙烯酰胺和 1 克 N,N'-亚甲丙烯酰胺溶于总体积为 60ml 温热(37℃左右)的去离子水中,充分搅拌溶解,补加水至终体积为 100ml。0。45µm 微孔滤膜过滤除菌和杂质,储于棕色瓶,4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存。严格核实 PH 不得超过 7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤.【保存条件】4℃避光(用铝箔纸包扎起来)保存【注意事项】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和 N,N'—亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具.可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能含有少量未聚合材料。1MTris—HCL(pH6。8)(浓缩胶 buffer)【组分浓度】1MTris—HCL名称用量备注Tris12。1g去离子水80ml浓盐酸9ml(36%的浓盐酸)预实验已确定去离子水加入去离子水定容至 100ml 后,室温保存【配制方法】称量 121.1gTris 碱溶于 800mL 的去离子水,充分搅拌溶解,加〉0。7mL 的浓 HCL 调节所需要的 pH值(7.4—大约 0。7mL,7.6-大约 0.6mL,8.0-大约 0.42mL),将溶液定容至 1L,高温高压灭菌后,室温保存。应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值,因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的 pH 值大约降低 0。03 个单位。【保存条件】室温保存。【注意事项】对人体有刺激性,请注意适当防护。1。5MTris—HCL(pH8.8)(分离胶 buffer)【组分浓度】1。5MTris-HCL名称用量备注Tris18.17g去离子水80ml浓盐酸3ml(36%的浓盐酸)预实验已确定去离子水加入去离子水定容至 100ml 后,室温保存【配制方法】1L称量 181。7gTris 碱溶于 800mL 的去离子水,充分搅拌溶解,加浓 HCL 调节所需要的 pH 值=8。8,将溶液定容至 1L,高温高压灭菌后,室温保存。(1。5mmol/LTris—HCL(pH8。8):18.15gTris 和48ml1mol/LHCL 混合,加水稀释到 100ml 终体积。过滤后 40C 保存.)【保存条件】室温保存【注意事项】应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值,因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的 pH 值大约降...

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