生物工程综合实验--SOD 工程菌构建实验报告集班级生物工程 1411 学号姓名实验室学生守则一、严格遵守实验室各项规章制度和管理措施,服从老师及实验技术人员的指导。二、严格根据实验要求,做好实验预习,实验之前 5 分钟进入实验室,及时、准确地完成实验任务,实事求是地完成实验报告,杜绝弄虚作假。三、严格执行操作规定,爱护仪器设备及工具。凡不按老师的指导擅自操作引起仪器、设备损坏者,应予赔偿。四、爱护实验室公共财物,节约水电、材料和试剂.未经允许不得随便挪动非实验需用的其他仪器,不得随便拆装仪器或将仪器、工具带至室外。五、持实验室的严肃宁静,不得大声喧哗、嘻闹,严禁在实验室内抽烟和吃东西。六、严防事故,确保实验室安全,发现异常情况,应及时向有关老师和管理人员报告.七、每次实验结束后,主动整理好仪器设备,归还所借器材,关闭电源、水源,按指导老师的要求做好实验结束工作及室内外的清洁卫生工作,经指导老师许可后,方可离开。预 习 报 告名称SOD 工程菌构建日期202512 。 11—12。13实验目的和要求:工程菌是利用基因工程的方法,将外源基因导入到适当的受体细胞株中,使其得到高效表达。这种经改造后的细胞株称为工程菌.工程菌在基因工程药物、污染治理、生物能源能多方面具有重要作用.SOD(超氧化物歧化酶),是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质.人体在不断地补充 SOD 后会具有抗衰老的特别效果,被卫生部批准为具有药物功能的物质。因此,采纳工程菌的原理和方法,体外大量合成 SOD,有利于降低其生产成本,扩大使用范围。了解 PCR的原理和实验流程。了解质粒提取的原理和方法.了解酶切的原理和方法,单双酶切的区别,粘性末端连接和平端连接的差异。了解 CaCl2 法制备大肠杆菌 DH5α 感受态及转化的原理。了解 SDS-PAGE 检测蛋白质的原理和方法。实验材料:pCM-T—SOD 质粒、Taq DNA 聚合酶、SOD 特异性引物、dNTPs PET—32A 质粒、质粒提取试剂盒 SOD 基因(PCR 回收产物)、PET—32A 质粒、EcoRV 和 HindIII 限制性内切酶大肠杆菌DH5α,1M 预冷的 CaCl2 溶液,LB 培育基,30%甘油,氨苄青霉素转化成功的菌液,蛋白上样缓冲液,Tris-Hcl,10% SDS,TEMED,10% AP(过硫酸铵),30% 丙烯酰胺单体(29:1)主要仪器:PCR 仪 水平凝胶电泳仪 摇床、超净工作台、离心机、干燥培育箱 垂直电泳系统、水浴锅主要步骤:一。PC...