miR-182、miR-183-5p和miR-96-5p与非酒精性脂肪肝的相关性研究摘要目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)可加重代谢紊乱，增加相关并发症的发病风险。因此，早期发现NAFLD是避免并发症不良影响的关键。本研究旨在识别miRNAs，以早期诊断及治疗NAFLD。方法：1.动物实验：采用高脂饮食建立NAFLD大鼠模型。把实验大鼠的肝脏取出，作为本次实验的标本，检测肝组织甘油三酯含量，然后切取大鼠肝组织并使用HE染色和油红O染色观察其组织学改变。使用QuantitativeReal-timePCR（qRT-PCR）手段，对大鼠肝脏组织中miR-182、miR-183-5p和miR-96-5p的表达水平进行检测。2.临床实验：在研究对象的选择上，选取生活习惯正常的健康人群和NAFLD患者进行对比，从河北省人民医院体检中心收集研究对象血清，用qRT-PCR方法检测研究对象血清中miR-182、miR-183-5p和miR-96-5p的表达水平并进行比较。结果:动物实验1.各组实验鼠的重量、鼠的肝脏湿重、实验鼠在未进食情况下的血糖数值、TG含量的比较PAGE\*MERGEFORMAT3HFD组大鼠体重、肝湿重高于ND组（P<0.05）。TG含量在HFD组明显升高，且P值小于0.01。但两组实验组中的实验鼠未进食情况下的血糖值无明显差异，P值大于0.05。2．肝脏组织病理学检测结果比较HE染色：ND组肝组织健康情况良好，没有出现细胞发生炎症情况，也没有出现肝组织内脂肪发生病变。与之相比，HFD组肝脏情况就发生病变，病变肝细胞气球样变肿大且间质组织中，均匀一致的蛋白质蓄积物质呈现出没有结构、半透明的状态，肝小叶功能混乱，小叶内也有大量细胞出现炎症。油红O染色：ND组未见明显脂滴积累，HFD组可见大量脂滴积累。3.各组大鼠肝脏miRNA的表达与ND组比，HFD组肝脏中miR-182、miR-183-5P、miR-96-5P表达明显减少，差异有统计学意义（P<0.01）；临床实验1.基本数据的比较获得了100名符合入选标准的参与者(50名男性，50名女性)的数据。收集以下指标进行比较：身体体脂指数，也就是常见的BMI指数；白蛋白，也被称为ALB指标；血压，就是BP值；免疫球蛋白，也就是GLB值；空腹血糖，即FBG值；尿酸，又称UA值；总蛋白，即TP值；总胆固醇，又名TCHO值；(RCOO)3C3H5(Triglyceride，TG)；a1脂蛋白，也就是HDL-C值；低密度脂蛋白（LowDensityLipoproteinCholesterol，LDL-C）[1]。通过和健康组进行对照比较，可以发现非酒精性脂肪性肝病患者的BMI（P<0.05）、DBP（P<0.05）较高，NAFLD患者的血清中PAGE\*MERGEFORMAT3AST（P<0.05）、ALT（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.05）、UA（P<0.01）显著升高，HDL（P<0.01）显著降低。2.血清microRNA测定结果与正常组（Normal)相比，mir-182在非酒精性脂肪肝患者(NAFLD)的表达明显下降和减少,取得的差异值具有重要意义（P<5%）。与Normal组相比，miR-183-5P在NAFLD组表达明显减少，取得的差异值具有重要意义（P<5%）。与Normal组相比，miR-96-5P在NAFLD组表达明显减少，取得的差异值具有重要意义（P<5%）。结论:1.高脂饮食可以诱导大鼠肝脏脂肪变性。2.miR-182、miR-183-5P、miR-96-5p在脂肪肝组的大鼠肝脏中表达显著降低。3.miR-182、miR-183-5P、miR-96-5p在NAFLD患者的血清中表达显著降低，血清中miR-182、miR-183-5p、miR-96-5p可能成为筛查NAFLD新的标志物及潜在的治疗靶点。关键词：非酒精性脂肪肝；miR-182；miR-183-5p；miR-96-5pPAGE\*MERGEFORMAT3英文摘要ASSOCIATIONOFMICRORNAS(MIR-182,MIR-183-5PANDMIR-96-5P)WITHNON-ALCOHOLICFATTYLIVERDISEASEABSTRACTObjective:ToinvestigatetherelationshipbetweenmiR-182,miR-183-5pandmiR-96-5pandnon-alcoholicfattyliverdisease(NAFLD),andtoprovideastrongbasisfortheearlydiagnosisandtreatmentofNAFLD.Methods:1.Animalexperiment:Aratmodelofnonalcoholicfattyliverdisease(NAFLD)wasestablishedusingahigh-fatdiet.Theliveroftheexperimentalratswastakenoutasthespecimenofthisexperiment,soweneedtomeasurethetriglyceridecontentinthelivertissue.ThelivertissueofratswascutandthenthehistologicalchangeswereobservedbyHEstainingandoilredOstaining.qRT-PCRwasusedtodetecttheexpres...
