第1页共9页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第1页共9页标准的PCR实验室简介设计规划1、主体结构:主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。2、标准的三区分隔和气压调节:将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可打开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ和PCR扩增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。3、消毒:在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。4、机械连锁不锈钢传递窗:试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。5、地面地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的瓷砖(至少800mm×800mm)接缝需要小于2mm。6、照明灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。在建设的过程中应注意:●规范的安装流程和全面的服务流程。●严格按照规范科学设计的安装流程。●安装前需要确定以下安装条件,如:电源电压,电源进线位置,电话网络线进线位置,进水水压,最小安装空间,地面平整度,通风孔、进水管和下水管的位置等,理想状态的空间尺寸和通风口尺寸。实验室平面布局示意图第2页共9页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第2页共9页注:(1)试剂准备和标本制备区之间、标本制备和扩增区之间各有一传递窗传递试剂等物品,根据人物分流原则,实验人员由缓冲间经内走廊单向走入下一区间。非实验室工作人员不得进入内走廊。(2)三个区均配备独立空调。试剂准备区和标本制备区均由外向内排风,保持室内正压。扩增区由内向外抽风,保持室内负压。(3)三个区间配备移动紫外灯各一台。PCR装机培训第3页共9页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第3页共9页一、装机前准备1、询问需装机单位是否有移液器(必须有的量称为2ul、25ul、100ul、200ul等)、加热装置(杭州奥盛干浴锅温度必须达到100℃)、台式高速离心机(转速必须达到13000rpm)、低速离心机分离血清(转速必须达到3500rpm以上)、震荡混匀器。最好再配掌式离心机(用于将管壁上液体甩到管底)否则只能用手甩。2、自带物品:移液器tip头(200ul的黄枪头和10ul的小枪头)、薄膜手套、乳胶手套、0.5ml离心管、1.5ml离心管、离心管架。如有必要可自带移液器,规格分别为:0.5-10ul、5-50ul、20-200ul、100-1000ul。3、如果要自带试剂,一定要领取乙肝(HBV)荧光定量核酸检测试剂盒(罗氏专用试剂盒),还要配套带好免抽提标准品(两盒试剂配一套免抽提标准品)。4、清点设备:PCR仪一台、电脑主机一台、电脑显示器一台、打印机一台。二、路上注意事项1、PCR仪一定要小心轻放、保持正面向上,千万不能倒置。2、如果携带试剂盒,要在泡沫箱中放入冰袋,保持低温保存。三、装机1、查看场地,PCR实验室最好能分为三个:⑴样本处理(加样)室、⑵反应液配制室、⑶扩增室。2、将电脑显示器、主机、打印机和PCR仪连接好,查看是否可正常运行。3、将装有试剂盒的泡沫箱打开,把试剂盒以及免抽提的标准品存放入-20℃的冰箱,如马上使用,可存放在4℃的冰箱待用。四、实验(一)标本处理:在样本处理室进行,处理标本时需要戴乳胶手套。1、打开加热装置,把预设温度调到100℃。2、标本由装机单位提供,可选取阳性和阴性标本各一、二个。3、在离心管架上排上所需数目的0.5ml或1.5ml离心管待用。4、打开试剂盒,取出标本处理液A和B,将两者分别混匀待用。5、在每一个离心管中加入100ul标本处理液A,然后再逐一加入血清液100ul...