第1页共13页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共13页微生物与寄生虫学实验指导目录实验一微生物的形态学检测（2学时）实验二理化因素对微生物的影响（2学时）实验三肠道致病性细菌的分离与鉴定（4学时）实验四抗酸染色（2学时）实验五寄生虫学实验（2学时）第2页共13页第1页共13页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共13页微生物与寄生虫学实验序言本实验在于使学生加深和巩固课堂内容，并在掌握系统理论知识的基础上，学习微生物与寄生虫学的基本操作技能，通过实验加强无菌概念，培养独立工作和分析问题的能力，为今后有关的疾病诊断与中医中药的科学研究工作打下良好的基础。本实验指导共包括五个试验项目，共计教学12学时，按教学计划及大纲要求供我院中医学专业、针灸推拿专业、骨伤学专业、护理学专业、中西医结合等专业学生使用。第3页共13页第2页共13页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第3页共13页实验室规则本门学科实验的对象大多是病原微生物，如果不慎发生意外，不仅自身可能遭致感染，并有可能将病原微生物传给他人。因此，进入实验室必须遵守以下规则：1.非实验必需物品，不准带进实验室。2．进入实验室必须穿工作服，按规定就座，保持肃静。3．上实验课要严格遵守课堂纪律，不得高声谈笑及乱动物品，禁止吸烟和进食。4．实验时听从老师指导，牢固树立无菌观点，严格遵守无菌操作规程，若发生菌液污染，损坏物品等事故，应立即报告老师及时处理。5．实验中用过的染菌器材如吸管，试管和用过的玻片等应及时放人含有消毒液的容器内，不得放在桌上，也不可在水槽里冲洗。6．爱护公物，节约使用实验材料；注意安全使用水、电、煤气。7．实验完毕，按要求整理器材物品，打扫卫生。脱下工作服，消毒洗手后，离开实验室。8．作业应在规定时间内完成，实验报告要求简洁扼要，字迹清楚，画图力求正确、客观。第4页共13页第3页共13页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第4页共13页实验一微生物的形态学检测一、实验目的1、掌握细菌的基本形态（球菌、杆菌、弧菌）。2、掌握革兰氏染色的操作方法。3、熟悉生物显微镜的使用，特别是油镜的使用和保护；4、熟悉革兰氏染色的原理。二、实验内容（一）显微镜油镜的使用及保护1、原理：在一般微生物学实验中最常使用的是普通光学显微镜的油镜。油镜镜头透镜很小，进入镜筒的光线很少，使用时为了增加亮度，必须在标本玻片与油镜头之间，滴加香柏油，因为香柏油的折光率与载玻片相似，这样就可使通过聚光器进入载玻片的光线不会因折射而散失，几乎全部进入镜筒内，使视野明亮，物象清楚。2、材料与试剂生物显微镜及香柏油、二甲苯、标本片等。3、操作步骤（1）坐姿：使用显微镜油镜时，必须坐端，镜体保持垂直位，不要使载物台倾斜，以免香柏油或悬液标本流出。（2）识别油镜头：油镜头上一般刻有“X100”，“Oil”，“HI”等标记。（3）对光：用低倍镜对光，检查染色标本时光线宜强，要抬高聚光器，放大光圈，取得最大亮度。（4）滴加香柏油：将标本放在载物台上固定好。滴加香柏油1滴，换油镜检查。（5）找焦点：将油镜移至中央对准标本，从侧面注视镜头，并缓慢转动粗螺旋，使物镜筒下降，直至镜头浸于香柏油中并几乎接触到标本为止。然后将视线移至目镜，一面观察一面向上慢慢转动粗螺旋，待看到模糊的物象时，即改用细螺旋，调节焦点以寻求清晰的物象。（6）清洁保养：镜检完毕，将镜筒升起，取出标本片，用镜纸将镜头上的油擦净。若油已干，可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去油迹，再用擦镜纸揩去二甲苯。然后，将聚光镜降下，各物镜呈“八”字形，套好保护套。（二）细菌的革兰氏染色法1、原理G+菌细胞壁结构致密（肽聚糖层厚），且脂质含量少，乙醇不易渗入脱色。G-菌细胞壁结构疏松（肽聚糖层薄），且脂质含量多，乙醇溶解脂质后易渗入细胞而脱色。G+菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的细菌不被乙醇脱色；G-菌菌体内核糖核酸镁盐含量小，易被乙醇脱色。G+菌等电点比G-菌...
