研究报告微生物学通报MAR20,2009,36(3):389~392Microbiology©2009byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn红色诺卡氏菌的生物活性张祝兰*唐文力黄颖桢洪金基(福建省微生物研究所福建福州350007)摘要:为了考察红色诺卡氏菌菌体(NC)的生物活性,通过一定浓度的NC对小鼠灌胃给药,检测其毒性及对免疫器官、巨噬细胞(MΦ)吞噬功能的影响和对肉瘤S180抑制作用。结果表明小鼠口服NC,LD50>10g/kg;NC明显增加小鼠胸腺脾脏重量、提升白细胞数量和提高小鼠MΦ的吞噬活性;对小鼠腹腔MΦ具有明显的激活作用,激活了的MΦ能增强抑杀白色念珠菌作用,正常的小鼠MΦ也有一定的杀菌作用,两者差异显著;对小鼠S180腹水型转实体瘤具有明显的抑制作用。由此得出的结论是,NC毒性低,能显著增强机体免疫功能,具有抗病原微生物感染及明显的抑瘤作用。关键词:红色诺卡氏菌,免疫,抑瘤,生物活性BioactivityofNocardiarubraCellZHANGZhu-Lan*TANGWen-LiHUANGYing-ZhenHONGJin-Ji(FujianProvinicalInstituteofMicrobiology,Fuzhou,Fujian350007,China)Abstract:ToinvestigatethebioactivityofNocardiarubraCell(NC),themicewereusedtoassaythetoxicity,theeffectsonimmuneorgans,phagocytesofperitonealmacrophageandtheantitumoractivitybyperfusionofNCtothestomachofmice.ResultsindicatedthatNCcouldobviouslystimulateinvitrothephagocytosisofperitonealmacrophagefrommice,andremarkablyinhibitthegrowthofS180inmice,anditsLD50wasmorethan10g/kg.Inconclusion,NChadlowtoxicity,itcouldsignificantlyenhancetheorganismimmunologicfunctionandhadobviousantitumoreffectandtheanti-infectioneffectagainstapathogenicmicroorganism.Keywords:NocardiarubraCell,Immunity,Antitumor,Bioactivity在从微生物筛选生物活性物质过程中,筛选到一株红色诺卡氏菌Nocardiarubra03-PO-8[1],其细胞壁骨架(Nocardiarubracellwallskeleton,N-CWS)与BCG、CP、干扰素、胸腺因子D等同属生物反应调节剂,已证实N-CWS能激活机体免疫功能,增强免疫细胞的活性,诱生干扰素等细胞因子[2,3],适用于各种肿瘤引起的胸腹水的控制,肺癌、恶性黑色素瘤、膀胱癌、恶性淋巴瘤、晚期胃癌和食道癌的辅助治疗[4,5]。但临床上应用的是N-CWS针剂,注射给药可能出现局部皮肤红肿结节,个别会溃疡,部分患者有发热反应等副作用,有的患者因此被迫停药,影响病人的继续治疗[6]。目前尚未见红色诺卡氏菌菌体(NC)的相关免疫药理药效学方面的报道,本研究通过对小鼠灌胃给药探讨NC的毒性、免疫活性及抑瘤活性,旨在为寻找最佳的给药途径提供依据。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株：Nocardiarubra03-PO-8,Candidaalbi-cansATCC11653(本所提供)。1.1.2试剂：葡萄糖(分析纯,中国医药集团上海化学试剂厂),酵母粉(DIFCO)。1.1.3动物：ICR小白鼠(购自福建医科大学动物实*通讯作者：Tel:86-591-83470740;:jessylan9963@sina.com收稿日期：2008-07-31;接受日期：2008-11-07张祝兰等:红色诺卡氏菌的生物活性2验中心,雌雄各半,体重18g~22g)。1.1.4瘤株：肉瘤S180(购自中国科学院上海药物所,福建医科所传代保种)。1.1.5培养基：YD培养基。1.1.60.075%中性红：称75mg中性红(Neutralred,C15H17N4Cl,生物染色素,上海试剂三厂)溶于100mL生理氯化钠溶液中,高压灭菌。1.1.7细胞裂解液：0.1mol/L乙酸：乙醇=1：1(V/V)。1.1.8仪器：J6-HC高速离心机(BECKMAN),双目显微镜(OLYMPUS),XDS-1倒置显微镜(重庆光学仪器厂),CO2培养箱(ColeParmer),DG3022A酶联免疫检测仪(国营华东电子管厂)。1.2方法1.2.1NC的制备：采用摇瓶发酵法,在500mL三角瓶中加入100mL的YD培养液,并接种一定量的红色诺卡氏菌03-PO-8菌丝块,32C二级培养96h,收集菌体并加工处理获得红色诺卡氏菌菌体(简称NC)。1.2.2毒性试验：选用NC样品最大浓度最大给药量进行最大耐受量试验,即NC250mg/mL,每只小鼠灌胃0.80mL,连续观察14d。1.2.3免疫器官影响试验：试验组(剂量分别为NC5.00g/kg、2.50g/kg、1.25g/kg)每只小鼠每日定时灌胃0.5mL,连续15d,对照组以等量的生理氯化钠溶液代替,停药次日眼眶静脉穿刺采血,行外周白细胞...
