第十三章荧光分析法课件CONTENTS•荧光分析法概述•荧光分析法的基本类型•荧光分析法的实验技术•荧光分析法的样品处理技术•荧光分析法的优缺点•荧光分析法的应用实例01荧光分析法概述荧光分析法的定义01荧光分析法是一种基于物质发射荧光特性的分析方法,通过测量荧光光谱和荧光强度,可以对物质进行定性和定量分析。02荧光分析法具有高灵敏度、高选择性、非破坏性和可视化等特点,广泛应用于化学、生物学、医学、环境科学等领域。荧光分析法的原理当物质吸收特定波长的光后,会从基态跃迁至激发态,当激发态的分子返回基态时,会释放出特定波长的荧光。荧光分析法的原理就是通过测量荧光光谱和荧光强度,确定物质的种类和浓度。不同物质具有不同的荧光光谱和荧光强度,因此可以根据这些特征进行定性和定量分析。荧光分析法的应用环境监测药物分析荧光分析法可以用于药物成分的定性和定量分析,以及药物代谢和药物动力学研究。荧光分析法可以用于检测水体、土壤、空气中的污染物,如重金属离子、有机污染物等。01020304生物医学研究食品安全荧光分析法可以用于研究生物分子的结构和功能,以及细胞代谢和信号转导过程。荧光分析法可以用于检测食品中的添加剂、农药残留、重金属等有害物质。02荧光分析法的基本类型原子荧光分析法原子荧光分析法的基本原理是原子在辐射能激发下达到激发态,再返回基态时发射荧光,通过测量荧光的强度来计算待测元素的浓度。原子荧光分析法是一种基于原子在辐射能激发下发射的荧光强度进行定量分析的方法。该方法主要应用于元素分析,如砷、硒、汞等,具有较高的灵敏度和选择性。分子荧光分析法分子荧光分析法是一种基于分子在光激发下发射的荧光强度进行定量分析的方法。该方法主要应用于有机化合物和生物分子的分析,如蛋白质、DNA、RNA等,具有较高的灵敏度和特异性。分子荧光分析法的基本原理是分子在光激发下达到激发态,再返回基态时发射荧光,通过测量荧光的强度来计算待测分子的浓度。时间分辨荧光分析法时间分辨荧光分析法是一种基于时间分辨技术进行荧光测量的方法。该方法主要用于超痕量元素和化合物的时间分辨荧光分析法的基本原理是利用分析,如铀、钚、有机锡等,具有较高不同元素或化合物发射荧光的寿命不同,的抗干扰能力和灵敏度。通过测量荧光的寿命来计算待测元素或化合物的浓度。同步荧光分析法该方法主要用于多组分混合物中各组分的分析,具有较高的抗干扰能力和选择性。同步荧光分析法是一种利用同步技术进行荧光测量的方法。同步荧光分析法的基本原理是利用不同组分发射荧光的波长和角度不同,通过测量荧光的波长和角度来计算待测组分的浓度。03荧光分析法的实验技术荧光激发光谱和发射光谱的测量荧光激发光谱的测量通过测量不同波长的激发光下荧光发射强度的变化,可以确定荧光物质的激发光谱。这有助于了解荧光物质的吸收特性和发射特性,为荧光物质的识别和定量分析提供依据。荧光发射光谱的测量在固定波长的激发光下,测量荧光发射光谱可以了解荧光物质在不同波长下的发射特性。通过发射光谱的测量,可以确定荧光物质的主要发射波长,有助于提高荧光物质的识别准确性和定量分析的精度。荧光量子产率的测量荧光量子产率的定义荧光量子产率是指单位时间内荧光物质发射的荧光光子数与吸收的光子数之比。它是荧光物质的重要参数,反映了荧光物质将吸收的光能转化为荧光光子的效率。荧光量子产率的测量方法通过比较已知量子产率的荧光标准物质和待测荧光物质的吸光度和荧光发射强度,可以计算出待测荧光物质的荧光量子产率。常用的测量方法有绝对法和相对法,其中绝对法更为准确,但操作较为复杂。荧光寿命的测量荧光寿命的定义荧光寿命是指荧光物质发射荧光的光子数衰减到初始值的1/e所需的时间。它是荧光物质的重要参数,反映了荧光物质将吸收的光能转化为荧光光子的持续时间。荧光寿命的测量方法通过测量不同延迟时间下的荧光发射强度,并利用指数衰减函数进行拟合,可以求得荧光物质的荧光寿命。常用的测量方法有单光子计数法和时间相关单光子计数法,其中时间相关单光子计数法具有更高的时间分辨率和更低的探测限。04...