植保生物技术第一章绪论1、生物技术(生物工程):以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他自然学科的原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需要的产品或达到某种目的的技术。2、生物技术的内容。答:基因工程、细胞工程、发酵工程、蛋白质工程、酶工程第二章细胞工程第一节植物组织培养学1植物组织培养:是指用无菌方法使植物体的离体(invitro)器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称,也称之为离体培养(Invitroculture)或试管培养。2几个重要的概念:愈伤组织:原本是指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在植物细胞组织培养中,愈伤组织则指在人工培养基上由外植体(explant)形成的一团无序生长的薄壁细胞。外植体:由活体(invivo)植物体上提取下来的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。脱分化:在细胞组织培养中,一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程,即形成愈伤组织的过程,叫做脱分化。再分化:植物的成熟细胞经历了脱分化之后,即形成愈伤组织之后,由愈伤组织能再形成完整的植株,这一过程叫做再分化。植物细胞全能性:植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。3植物组织培养过程离体的植物器官、组织、细胞(脱分化)愈伤组织(再分化)根芽()再生植株第二节培养基及培养条件1培养基的成分及作用。水、无机盐、有机化合物、天然提取物、琼脂、其它(PH、活性炭、抗生素、抗酚类物质污染的添加剂、生长抑制剂、染色剂)大量元素:O、H、N、C、P、K、Mg、S、Ca、N植物激素可分为如IAA生长素和如6-BA细胞分裂素两大类。2组培应如何考虑培养条件。在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件,培养基组成、PH值、渗透压等各种化学环境条件都回影响组织培养育苗的生长和发育。第三节组织培养技术及其在植保中的应用1掌握植物离体快繁技术经历的阶段答:阶段Ⅰ:无菌培养物的建立阶段Ⅱ:茎芽的增殖阶段Ⅲ:离体形成枝条的根阶段Ⅳ:植株的移栽2掌握花药和花粉培养、器官培养、细胞培养、原生质培养在植保上的应用花药培养——因外植体为花药,内含花粉,所以会产生单倍体、二倍体;花粉培养——因外植体为花粉—产生单倍体。幼胚培养:原胚期——球形期——心形期——鱼雷期——子叶期成熟胚培养:子叶期后——发育完全的胚,在大量元素糖培养基上就能长成幼苗。胚珠培养:诱发大孢子发育成单倍体;表面消毒后取胚珠,带胚座或部分子房。试管受精、胚乳培养植物的器官培养:植物的根、茎、叶、花器和果实的无菌培养1、离体根培养2、离体茎培养3、离体叶培养4、花器官和种子培养细胞培养:材料的选择变异来源选择压力突变体分离突变体鉴定突变材料的保持和利用原生质体融合可选育具有优良性状的育种材料第四节植物无病毒苗的培育1、掌握热处理和茎尖培养脱毒的原理热处理脱毒:是当植物组织处于高于正常温度的环境中时,组织内部的病毒受热后部分或全部钝化,不能生成或生成病毒很少,以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的。茎尖培养脱毒:植物体内病毒靠维管束系统移动,分生组织中没有维管束存在,病毒只靠胞间连丝移动,速度很慢,难以追上生长活跃的分生组织,所以旺盛生长的根尖、茎尖一般都无病毒或很少有病毒分布,生长点(分生组织约0.1-1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。2、掌握脱毒的方法:热处理脱毒、微茎尖培养脱毒、其他途径脱毒3、掌握脱毒苗带毒状况的检测方法:指示植物(indicatingPlant)法、抗血清(antiserum)鉴定法、电子显微镜(electricmicroscope)检查法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、核酸斑点杂交技术(NASH)、其它第三章分子生物学基础第一节工具酶1、概念:核酸酶:通过切割相邻的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,从而导致核酸分子多核苷酸链发生水解断裂的蛋白酶。核糖核酸酶:专门水解RNA分子断裂的叫做核糖核酸酶(RNase)。脱氧核糖核酸酶:特异水解断裂DNA分子的叫做脱氧核糖核酸酶(DNase)核酸内切酶:从核酸分子内部切割磷酸二酯键使之断裂成小片断核酸外切酶:...