WatersQuattroPremier液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程(SOP2004-11-09目录1.简述(11.1样品入口(21.2真空系统(21.3数据系统(22.环境要求(33.仪器使用(33.1开机步骤(33.2质谱调谐窗口各项参数设定(53.3创建项目(63.4质量校正(73.5调谐(Tuning(143.6信号采集(153.72695型液相色谱(InletMethod(193.8创建质谱方法(253.9创建样品列表(273.10运行样品列表(SampleList(303.11QuanLynx来编辑定量方法(393.12用QuanLynx进行批处理(443.13查看QuanLynx定量结果(473.14关机(524.注意事项(535.维护与保养(541.简述QuattroPremier(Figure1-1是一台高效串联四极杆质谱仪,用于常规LC/MS/MS分析。Figure1-1QuattroPremierMassSpectrometer样品的离子化发生在处于大气压状态下的离子源中。离子通过取样锥孔进入真空系统,然后穿过源travelling-wave(T-WaveTM进入第一级四极杆,在此按照质/荷比(m/z过滤(Figure1-2。按照质量数分开的离子进入T-Wave碰撞室,进一步发生碰撞诱导裂解(CID或者直接进入第二级四极杆。碎片离子通过第二级四极杆进行质量分析。离子最后经过倍增电极,phosphor和光电倍增器检测系统检测。输出信号被放大,数字化后传给信号系统。Figure1-2QuattroPremierSchematic1.1样品入口该仪器可以与下列两种进样方式组合:a.HPLC系统,可以提供LC流出组分的分子量信息,进行目标分析和定量。b.注射泵,分析宝贵的,低浓度的样品。HPLC系统或注射泵将样品输入ZsprayTM离子源中。通过改变探头来改变离子化模式。探头上的识别pins可以鉴别系统的离子化模式。1.2真空系统由外置的初级抽气泵和内设的涡轮分子泵提供真空系统。涡轮分子泵抽分析器和T-Wave离子传输区域的真空。初级抽气泵可以是旋转式泵或无油螺旋式泵。系统通过一个Pirani真空计监测涡轮分子泵的转速和真空度。如果真空度不够,Pirani真空计作为开关将中断仪器操作。真空隔断阀可以在不破坏真空的情况下进行离子源的日常维护。1.3数据系统包括embeddedPC,工作站和MassLynx软件。MassLynx可以控制整个系统,包括设置和运行HPLC系统,仪器调谐,采集数据和数据处理。embeddedPC和工作站之间的通讯由网线连接。1.环境要求2.1仪器室要保持整洁、干净、无尘;配套设施布局合理。2.2仪器室温度应相对稳定,一般应控制在20-25℃,保持恒温;相对湿度最好为50-70%,室内应备有温度计和毛发湿度计,一般采用空调和吸湿机调节温度和湿度。2.3仪器室电源要求相对稳定,电压变化要小,最好配备不间断稳压电源,防止意外停电。2.仪器使用3.1开机步骤3.1.1分别打开质谱、液相色谱和电脑电源,此时质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。3.1.2待液相色谱通过自检,进入Idle状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。a.DegasserOn(打开脱气机。b.WetPrime(湿灌注。c.PurgeInjector。d.平衡色谱柱。3.1.3双击桌面上的MassLynx4.0图标进入质谱软件。此时,如果进入软件时出现提示:“Theembeddedsystemisnotresponding,Thesystemwillruninstandalonemode”,则说明质谱内置的CPU(EPC与电脑主机的通讯联系还未建立,请稍等后再进入软件,如果打开软件仅为处理数据则没有关系(质谱主机电源未开时进入软件也会有同样提示。3.1.4点击质谱调谐图标(MSTune进入质谱调谐窗口。Figure3-1InitialTunePage3.1.5选择菜单“Options>Pump”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。等达到真空要求后,仪器前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。3.1.6点击真空状态图标,检查真空规的状态,确认真空达到要求。2.1.7确认氮气气源输出已经打开,输出压力为90psi。3.1.8设置源温度(SourceTemp到目标温度。3.2质谱调谐窗口各项参数设定3.2.1电喷雾电离源(ESI3.2.1.1在质谱调谐窗口选择要使用的离子模式,IonMode>Electrospray+。3.2.1.2点击进入Source界面,设定Source界面里各项参数。加在ESI源内毛细管上的高压,正离子模式一般是在Capillary(KV2.5-3.75KV之间优化,负离子模式一般是在2.0-3.0KV之间优化。在负离子模式时,如果毛细管电压设置过高容易引起放电现象。Cone(V样品锥孔电压,一般在10-100V之间优化,通常来说,分子量小的样品选择的锥孔...
