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BIOLOG法微生物鉴定微生物群落结构主要功能OneTechnologyClinicalPlantDiseaseFoodIndustrialQCVeterinaryEducationMicrobialEcologyResearchBiolog’sBiolog’sFundamentalFundamentalTechnologyTechnologyWithaVastFamilyofApplicationsAndProducts应用领域检测原理BIOLOG公司独特创的碳源利用方法，以微生物对不同碳源代谢率的差异，针对每一类微生物筛选95种不同碳源，配合四唑类显色物质（如TTC、TV），固定于96孔板上，接种菌悬液后培养一定时间，通过检测微生物细胞利用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质反应导致的颜色变化（吸光度）以及由于微生物生长造成的浊度差异，与标准菌株数据库比较，即可得出鉴定结果。Biolog’sMulti-TraitTestFormatReductionofTetrazoliumViolet细菌和酵母的显色物质：四唑紫FilamentousFungiDatabase丝状真菌显色物质：INTDevelopmentoftheBiologMicrobialIdentificationSystemInitiallyScreenedOver500CarbonSources>130SpeciesGNMicrobes>65,000DataPointsBiologGNMicroPlateGN2MicroPlateGP2MicroPlateYTMicroPlateWellsWithTetrazoliumVioletWellsWithoutTetrazoliumVioletANMicroPlateFFMicroPlate功能一：微生物鉴定重点内容鉴定步骤软件应用鉴定实例维护保养疑难解答鉴定步骤分离纯化平板扩大培养制备菌悬液调整浊度接种培养获取结果分离纯化保证纯种是微生物鉴定的首要条件分离纯化采用常规微生物操作方法可以用国产培养基或自己筛选的培养基鉴定步骤总览BUG+B或TSA+BAirTypically30℃GN/GP-IF52%TGN2-150μl4-6,16-24BUG+B或TSA+BAirTypically35-37℃GN/GP-IF+T61%TGN2-150μl4-6,16-24CHOC6.5%CO2Typically35-37℃GN/GP-IF+T20%TGN2-150μl4-6,16-24BUG+BAir/6.5%CO2Typically35-37℃GN/GP-IF+T20%TGP2-150μl4-6,16-24BUG+M+TPLUSstreakingAirTypically30℃GN/GP-IF28%TGP2-150μl4-6,16-24BUA+BANATypically35-37℃AN-IF65%TAN-100μl20-24BUYAir26℃Water47%TYT-100μl24,48,72培养基培养环境培养温度接种液种类菌悬液浊度接种量培养时间GN-NENTGN-ENTGN-FASGP-COCCUSGP-RODGP-RODSBANYTOxi+TSI=A/AorK/AOxi－微生物好氧菌GNGP厌氧菌酵母菌2%MEAirTypically26℃FF-IF75%TFF-100μl24,48,72,96霉菌FFTSI=K/KorK/A说明1除嗜热菌外，其它均在26℃，30℃或35~37℃需要在巧克力培养基或需CO2的微生物，以及在BUG+B上形成的菌落小于1mm的微生物，为FAS(苛生菌)农业微生物不必在BUG培养基中加B(血)对于GN-NENT，如果A1孔阳性，则需在接种液加疏基乙酸钠对于GP-COCCUS,GP-ROD，如果A1孔阳性，接种液中除加疏基乙酸钠外，还需加水杨酸钠。说明2氧化酶反应：判断细菌是否产氧化酶，其产生的氧离子与氧化酶试剂(对盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺)反应生醌类物质，颜色变化为：粉红—紫色—蓝色—黑色TSI反应：用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌(E.coli)，则产生大量的酸，使整个培养基呈现黄色。如培养基接种后产生黑色沉淀，是因为某些细菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。K/K—整支试管斜面红色K/Aw—斜面表面红色，底部浅黄色A/A—整支试管黄色K/A—斜面表面浅红色，中部和底部中黄色TSI(三糖铁)琼脂实验反应A/AA/KK/KK/Aw乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1遇酸变黄色硫酸亚铁铵、酚红、硫代硫酸钠志贺氏菌：能分解葡萄糖，产酸不产气，不发酵乳糖，不产H2S大肠杆菌：能分解葡萄糖，产酸产气，能分解乳糖，不产生H2S沙门氏菌：能分解葡萄糖，多数产气，不发酵乳糖，产生H2S，志沙大说明3：厌氧菌如果发现厌氧菌是革兰氏阴性杆菌，必须做卡那霉素药敏试验。如果抑菌圈≥10mm，说明此菌对卡那霉素敏感，为假设梭菌。如果无抑菌圈或抑...