当归�川芎配伍对小鼠原发性痛经的影响王欢,唐于平*,郭建明,丁安伟*,李伟霞,姜玮,段金廒(南京中医药大学江苏省方剂研究重点实验室,江苏南京210046)[摘要]�目的:通过观察当归�川芎不同配比(1�0,2�1,1�5�1,1�1,1�1�5,1�2,0�1)、不同制法(水提液、50%醇提液、先水提后95%醇提液)对痛经模型小鼠的影响,初步探讨当归、川芎药对的配伍用方机制。方法:采用原发性痛经模型小鼠,观察药物对小鼠30min内扭体次数及对子宫匀浆中NO和Ca2+含量的影响。结果:不同制法当归、川芎药对,先水提后醇提液作用最强,醇提液次之,水提液最弱;不同配比当归、川芎药对,先水提后醇提液及醇提液的1�5�1配比作用最强;其不仅能显著降低痛经模型小鼠的扭体次数,而且能显著增加子宫组织内NO含量,降低Ca2+含量。结论:当归�川芎配比用量不同,制法用法不同,对痛经模型小鼠的镇痛作用强度所呈现的趋势不同可能与其所溶出的效应物质有关。[关键词]�当归;川芎;配比;制法;原发性痛经[收稿日期]�2009�11�11[基金项目]�国家自然科学基金项目(30873235);江苏省自然科学基金项目(BK2008455);江苏省高校自然科学重大基础研究项目(06KJA36022,07KJA36024);江苏省六大人才高峰!项目(06�C�020,07�C�010);南京中医药大学基础研究与重点培育专项基金项目(08XPY03)[通信作者]�*唐于平,E�mai:lyupingtang@njutcm.edu.cn;*丁安伟,E�mai:lltcm@fnjutcm.edu.cn��当归、川芎分别为伞形科植物当归Angelicasinensis(Oliv�)Diels、川芎LigusticumchuanxiongHort�的干燥根及根茎。当归性柔而润,补血调经、活血止痛、祛瘀消肿、润燥滑肠;川芎辛温香窜,行气活血、祛风止痛。二药常伍用,用于养血调经、行气活血、散瘀止痛。历代许多用于调经止痛的妇科良方如四物汤及其类方均含有这2味药,它们本身也组成妇科方剂,但当归川芎配伍比例与用法的不同,其功效也有差异。实验室在前期研究工作[1�2]基础上,选择对小鼠原发性痛经模型的影响作为评价指标,比较当归和川芎7种配比(1�0,2�1,1�5�1,1�1,1�1�5,1�2,0�1)与3种提取方法(水提取来模拟水煮,用50%醇提取模拟酒水煎煮,先水提再95%醇提近似模拟散剂)的提取液的功效差异,为当归�川芎药对的配伍用方机制研究提供一定的依据。1�材料1�1�动物�清洁级雌性ICR小鼠,体重18~22g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,合格证号SCXK(沪)2007�0005。1�2�药物�当归为伞形科植物当归A�sinensis的干燥根,来源于甘肃岷县;川芎为伞形科植物川芎L�chuanxiong的干燥根茎,来源于四川彭州。并经南京中医药大学段金廒教授鉴定。称取当归川芎不同配比(1�0,2�1,1�5�1,1�1,1�1�5,1�2,0�1)混合药材各6kg,每个配比再均分成3份,每份2kg分别进行热回流水提取、热回流50%醇提取和先水提再用95%醇提,提取液浓缩干燥成浸膏。1�3�试剂与仪器�苯甲酸雌二醇注射液(天津金耀氨基酸有限公司,批号0904201);缩宫素注射液(上海第一生化药业有限公司,批号090206);西乐葆(辉瑞制药有限公司,批号BK081004);钙离子及一氧化氮测定试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号20090717);PowerWave340酶标仪(Bio�TEK,美国)。2�方法2�1�小鼠原发性痛经模型的建立[3]�选用ICR种雌性小鼠,体重18~22g,随机分组,每组10只。以雌激素和缩宫素联合复制原发性痛经模型。以0�01mg∀g-1∀d-1给小鼠连续ip苯甲酸雌二醇8d,使小鼠子宫同步化。第8天,ip缩宫素0�01mL∀g-1,制造小鼠原发性痛经动物模型。2�2�对痛经模型小鼠扭体的抑制作用�本实验参考了四物汤中当归川芎的用量(18g),依据体表面积折算给药剂量,相当于人的12倍临床生药量。在预实验中,作者选择了当归川芎(1�0,1�1,0�1)3种制法,分别考察了临床等效量的5,2�5,1�25,0�625倍生药量对痛经模型小鼠扭体作用的影响。根据结果选择了临床等效量的2�5倍生药量(此剂量下,∀892∀第35卷第7期2010年4月��������������������Vol�35,Issue�7Apri,l2010药物对小鼠镇痛作用最强),经折算给药组给药剂量为生药量9g∀kg-1∀d-1。实验分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、当归川芎(1�0,2�1,1�5�1,1�1,1�1�5,1�2,0�1)...
