收稿日期：2000-08-24修回日期：2000-12-07基金项目：全军“九五”指令性攻关课题专项基金（96L043）文章编号：1001-6325（2001）04-0352-04肠道营养支持对烧伤大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用及其机理彭曦，汪仕良，王斐，陶凌辉，赵云，尤忠义（第三军医大学西南医院烧伤研究所，重庆400038）摘要：观察不同营养支持途径对严重烧伤所致肠粘膜屏障功能损害的影响并探讨其机制。采用30%体表面积!度烧伤大鼠模型，随机分成正常对照（COntrOI），静脉营养（PN）及肠道营养（EN）组，观察了烧伤后肠粘膜屏障功能的变化及PN和EN对其的影响。结果显示，烧伤后肠粘膜通透性、血浆二胺氧化酶（DAO）活性明显高于对照组（!<0.01），而肠上皮细胞增殖指数、肠三叶因子（ITF）含量、肠粘液层厚度及己糖和唾液酸的含量则明显降低（!<0.05）。同PN相比，EN对上述指标均有一定的逆转作用。提示EN较PN更有利于减轻肠粘膜受损程度，促进肠粘膜修复。关键词：肠道营养；静脉营养；肠粘膜屏障；大鼠；烧伤中图分类号：R644文献标识码：A严重烧伤后，肠腔中存在的细菌及内毒素可穿越肠粘膜，形成“肠源性感染”。此外，细菌及内毒素的移位可造成巨噬细胞过度活化，释放大量炎性介质，引发“肠源性高代谢”。无论是肠源性感染还是肠源性高代谢，其发生发展的关键都是肠粘膜屏障功能损害［1］。因此，如何有效维护和重建肠粘膜屏障已成为目前烧伤研究的重要课题。我们以往的研究发现合理的营养支持在维护肠粘膜屏障功能中具有重要作用，特别是实施肠道营养后，可明显减轻严重烧伤所致的肠道损害［2］。但是，对于烧伤后实施肠道营养的效果尚存在不同看法，多数学者持肯定态度，但也有相反的意见，认为肠道营养可加重胃肠负担，引起恶心呕吐胃潴留及反流性肺炎等不良反应［3］。此外，对肠道营养的胃肠道保护机制尚缺乏深入研究。为此，本实验比较了肠道营养和静脉营养两种途径对严重烧伤所致大鼠肠粘膜屏障功能损害的影响并探讨其机制，以期为烧伤病人的营养支持提供理论依据。!材料与方法!"!动物模型1.1.1模型制作及分组：健康成年Wistar大鼠88只，体重215125g，雌雄不拘。随机分成三组，静脉营养（parenteraInutritiOn，PN）组，肠道营养（enteraInutritiOn，EN）组及正常对照（cOntrOI，C）组。对照组不予烧伤，其它两组烧伤前禁食121，1%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔麻醉，背部电推剃毛，称重后置剃毛区于92C水浴中18s，造成30%体表面积!度烧伤（病理切片证实）。伤后按50mL/kg腹腔注入乳酸林格氏液抗休克。大鼠静脉营养模型制作参见文献［4］，为了尽可能使PN和EN两组具有可比性，EN组亦采用同样的手术程序，暴露颈外静脉并予以结扎后逐层缝合。1.1.2时相设置：实验分烧伤后（PBD）1、2、3、5、7d五个时相点（每时相点包括PN和EN两组，每组每时相8只大鼠），其中PN组于伤后21开始以微量泵静脉泵入营养液，速度为1~2mL/1，自由饮水。EN组也于伤后21开始灌喂营养液，每天计划量分4~6次喂完，不限饮水。1.1.3营养液的配制：按糖54.5、脂31.5、蛋白14的比例配制营养液。其中糖占15.3%（w/V），卡氮比为18311，糖、脂供热比为1.7311。在层流台上将各种营养成份混匀后分装，4C保存，用前复温至37C。253基础医学与临床BasicMedicaISciencesandCIinics2001.21（4）1.1.4营养素供应量：按每天732.2KJ/kg即152mL/kg的标准供给。伤后第一天摄入标准量的1/3，第二天摄入1/2，第三天起摄入全量。1.2检测指标1.2.1肠粘膜通透性测定：经股静脉注入［99mTc］DTPA-HAS，剂量为1480kBg/kg，30min后断头处死大鼠，测定肠腔灌洗液的cpm值，以对照大鼠肠粘膜通量为1，用烧伤后各时相与之的比值来反映肠粘膜通透性的改变。由于99mTc半衰期仅6h，实验中要设衰变对照，校正所测cpm值。1.2.2流式细胞术测定肠上皮细胞增殖指数：分离肠上皮细胞，调节细胞数为1X105，75%乙醇固定，弃固定剂，PBS洗2次，加5g/L的RNA酶0.5mL，混匀，37C水浴30min，加50mg/L的PI染色液0.5mL，摇匀，避光冷藏30min，上机检测，每份标本分析1万个细胞。据G1、S、G2及M各期细胞所占百分比，计算增殖指数（S+G2+M）。1.2.3血浆二胺氧化酶（DiamineOxidase...
