ACEI对糖尿病大鼠视网膜VEGF表达的作用VIP免费

ACEI对糖尿病大鼠视网膜VEGF表达的作用1郑志1，陈海冰2，许迅1，顾青11上海交通大学附属第一人民医院眼科，上海（200080）2上海交通大学附属第六人民医院内分泌科，上海（200233）E-mail:xuxun60@yahoo.com.cn摘要:目的揭示血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensinconvertingenzymeinhibitor，ACEI)对糖尿病大鼠视网膜视网膜血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)表达的影响独立于它的抗高血压作用并阐明VEGF表达与其视网膜毛细血管基底膜厚度（capillarybasementmembranethickness，BMT)改变的相关性。方法腹腔注射链脲菌素制作鼠DR模型，与正常鼠随机分别实施ACEI福新普利、β-受体阻滞剂心得安和安慰剂治疗。24周后，应用酶联免疫吸附法、免疫组化、westernblot技术和实时定量逆转录－多聚酶链反应分别检测血浆、玻璃体和视网膜VEGFmRNA及蛋白表达。应用透射电子显微镜计算机软件分析BMT。结果（1）糖尿病鼠玻璃体视网膜VEGFmRNA及蛋白表达显著高于对照组，ACEI治疗后则显著减少；（2）糖尿病鼠心得安治疗后，玻璃体视网膜VEGF蛋白及基因表达无显著性改变，ACEI治疗组玻璃体视网膜VEGFmRNA及蛋白表达显著性低于心得安治疗组，两组之间血压比较无显著性差异；（3）鼠玻璃体视网膜VEGF表达水平与BMT的改变呈显著性正相关。结论ACEI对DRVEGF表达的影响独立于它的抗高血压作用，ACEI治疗伴或不伴高血压的DR可发挥不依赖其降压作用的独特效果，心得安对DRVEGF表达无影响。关键词:血管紧张素转化酶抑制剂；β-受体阻滞剂；血管内皮生长因子；高血压；糖尿病视网膜病变中图分类号：R771.31引言糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)是一种严重的糖尿病慢性并发症，是常见的致盲性疾病。慢性高血糖、组织缺氧及各种致炎性细胞因子引起视网膜血管渗透性增加和新生血管形成，导致视力损害[1]。其中，血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)在DR病理生理过程中发挥重要作用。流行病学调查发现，高血压是DR独立的危险因子[2]。高血压恶化DR潜在的分子机制是其诱导对VEGF的表达[3]，赖诺普利治疗1型糖尿病视网膜病变患者2年，可有效地抑制其进展率可达50％，发展为增生性糖尿病视网膜病变的几率降低[4]。进一步研究提示，血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensinconvertingenzymeinhibitor，ACEI)有效治疗DR是通过降低视网膜VEGF的表达，但这种作用是直接作用还是通过降低体循环血压发挥间接作用，目前尚不得而知[5]。β-受体阻滞剂是另外一类常见的抗高血压药物，β-受体阻滞剂对DRVEGF表达有无影响，至今尚无研究。因此，本研究旨在：（1）揭示ACEI对DRVEGF表达的影响独立于它的抗高血压作用；（2）探讨β-受体阻滞剂对鼠DR视网膜VEGF表达是否有影响；（3）阐明DRVEGF表达与其视网膜毛细血管基底膜厚度（capillarybasementmembranethickness，BMT)改变的相关性。1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号：20060248077）资助1http://www.paper.edu.cn2材料和方法2.1试验动物48只雄性SD鼠（中国科学院上海动物中心提供），年龄8周，体重250～300g，随机行链脲菌素（STZ）腹腔注射（60mg/kg）制作鼠DR模型（n=24）和柠檬酸缓冲液腹腔注射作为对照（n＝24）。动物试验完全遵照眼科视觉研究中有关动物使用声明的相关准则。糖尿病鼠和正常鼠随机应用ACEI福辛普利（上海施贵宝）3mg・kg-1day-1和β-受体阻滞剂心得安（上海第十五制药厂）5mg・kg-1day-1，药物溶解于供鼠饮用的水中灌胃。所有试验鼠可自由食用为其提供的标准食物和饮用水。STZ腹腔注射后第二天检测血浆葡萄糖，凡大于15mmol/l被视为糖尿病。为了控制鼠体重和降低其死亡率，每周皮下注射胰岛素6U(Humulin-N,ⓇEliLilly&Co.,IN)2－3次。血糖和血压分别于0、12、24周进行检测。试验分为6组：对照组（C，n=8）；对照心得安组（对照＋心得安）（CP，n=8）；对照福新普利组（对照＋福新普利）（CF，n=8）；糖尿病组（D，n=8）；糖尿病心得安组（糖尿病＋心得安）（DP,n=8）；糖尿病福新普利组（糖尿病＋福新普利）（DP,n=8）。腹腔注射氯胺酮（100mg/kg）和异丙嗪（5mg/kg）麻醉，从鼠...