茶多酚对蛋白质糖基化作用的影响VIP免费

183彭善丽，张根义*(江南大学食品学院，江苏无锡214122)摘要:采用葡萄糖与谷氨酸在90℃下反应以及葡萄糖与牛血清白蛋白37℃反应模拟体外糖基化作用，通过在激发波长350nm，发射波长440nm测定荧光强度，探讨了不同浓度茶多酚对糖基化反应产物的影响。另外，腹腔注射链脲菌素(STZ)建立小鼠糖尿病模型，每天灌胃200mg/kg体重的茶多酚溶液，通过测定小鼠血清中糖化血红蛋白及糖基化终产物荧光强度的变化观察茶多酚对高糖机体内蛋白质糖基化的影响。结果表明:茶多酚对体外糖基化反应有抑制作用，而且存在剂量－效应关系;同时能降低糖尿病小鼠机体内糖化血红蛋白的含量，缓解由糖基化引起的糖尿病肾脏损伤。关键词:糖基化终产物(AGEs)，糖尿病，茶多酚，荧光检测，抑制EffectofteapolyphenolsonproteinglycosylationPENGShan－li，ZHANGGen－yi*(SchoolofFoodScienceandTechnology，JiangnanUniversity，Wuxi214122，China)Abstract:Effectofteapolyphenols(TP)ontheproductsofglycosylationweretestedinglutamicacid－glucoseandBSA－glucosereactionsystemrespectivelyat90℃and37℃.Thefluorescenceweretestedatanexcitationwavelengthof350nmandanemissionwavelengthof440nm.Besides，diabetesmellitus(DM)animalmodelswereinducedbyintraperitonealinjectionofStreptozocin，andMicestomachswereperfusedwithTPatthedoseof200mg/(kg·bw).Theglycosylatedhemoglobin(GHbA1c)andfluorescenceofserumwerealsotestedtoexaminetheeffectsofTPonproteinglycosylationinvivo.TheresultsshowedthatthefluorescenceintensityinvitroweredecreasedbyTPinadose－responsemanner.TPcanreducetheproductionofGhbA1candprotectthekidneyofthediabeticmice.Keywords:Advancedglycationendproducts(AGEs);diabetesmellitus;teapolyphenol;fluorescencedetection;inhibition中图分类号:TS201.2文献标识码:A文章编号:1002－0306(2011)12－0183－05收稿日期:2010－12－03*通讯联系人作者简介:彭善丽(1985－)，女，博士研究生，研究方向:食品科学。茶多酚(TeaPolyphenols)是一类多酚类化合物，为茶叶中的主要有效成分，研究表明，茶多酚具有抗氧化、降脂、抗衰老、防止血栓形成和抗心肌缺血等多种生理功能。TakakoYokozawa等研究表明，罗布麻茶(LuobumaTea)提取物能够降低糖基化所引起的蛋白质损伤［1］。糖基化不仅在加工食品中广泛存在，在人体内由于羰基化合物(还原糖类)和氨基化合物(蛋白)的存在也进行着非酶糖基化反应。尤其是糖尿病人持续高血糖会引起机体多种蛋白质非酶糖基化，并且由于高血糖和氧化应激，糖尿病人的AGEs生成加速。已有大量证据表明，持续高血糖引起机体多种蛋白质非酶糖基化，由此形成的AGEs在糖尿病并发症的发病机制中起重要作用［2－3］。这些糖基化终产物(AGEs)很多都具有荧光特性，使糖基化反应具备荧光性质［4］。本研究拟建立体外糖基化模拟体系，在反应体系中添加不同浓度茶多酚;通过测定糖基化反应的荧光性质及紫外吸收的改变探讨茶多酚对糖基化反应的影响。并构建糖尿病小鼠模型，对高糖机体进行茶多酚膳食干预，检测血清糖基化产物荧光强度及糖化血红蛋白含量的改变，同时观察茶多酚对糖基化引起的糖尿病肾病损伤的影响。1材料与方法1.1材料与仪器葡萄糖(Glc)、甘氨酸(Gly)、过硫酸钾(K2S2O8)国药集团化学试剂有限公司，分析纯;99%茶多酚(TP)日照力德士化工有限公司，食品级;叠氮化钠(NaN3)阿拉丁试剂(上海)有限公司，分析纯;牛血清白蛋白(BSA)ABTS生工生物工程上海有限公司，分析纯;链脲菌素(STZ)、水溶性维生素E(6－Hydroxy－2，5，7，8－tetramethylchroman－2－carboxylicAcid，Trolox)美国sigma公司，分析纯;小鼠糖化血红蛋白酶联免疫检测试剂盒美国R＆D公司;血清肌酐测定试剂盒、血清尿素氮测定试剂盒南京建成生物工程研究所;实验动物四周龄雄性清洁级KM小鼠，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司(许可证号SCXK(沪)2007－0005)。184血糖仪(onetouch)美国强生公司;Agilent1100高效液相色谱系统配有可变波长紫外检测器和Rev.A.06.03色谱工作站，美国安捷伦公司;H...