JChinMicrocircDec.2008,Vo.l12,No.6基金资助:国家自然科学基金资助项目(NO.30672278,30872823);湖北省自然科学基金资助项目(2007ABA108)作者单位:430030�湖北武汉,华中科技大学同济医学院同济医院眼科第一作者简介:李斌(1970-),男,汉族,湖北鄂州人,博士学位。研究方向:玻璃体视网膜疾病的治疗,糖尿病视网膜病变的基础研究和治疗,早产儿视网膜病变等。文章编号:1007-8568(2008)06-0340-03�实验研究�L-Rap在高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的表达变化李�斌,胡�军,向�艳,李贵刚,毛晓春,徐玲娟�摘要��目的�研究白细胞源性精氨酸氨基肽酶(Leukocyte-derivedArginineAminopeptidase,L-Rap)在高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的表达,分析L-Rap蛋白的功能。方法�体外培养人视网膜血管内皮细胞,实时定量PCR检测L-Rap在高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的表达变化,建立L-Rap的三维蛋白结构图,分析L-Rap蛋白的功能。结果�L-Rap的mRNA在高糖培养的人视网膜血管内皮细胞下降,L-Rap蛋白可能对血管生成因子、免疫炎症因子以及肾素-血管紧张素系统发挥作用。结论�L-Rap与糖尿病视网膜病变密切相关,可以从血管生成因子、免疫炎症因子以及肾素-血管紧张素系统这三个途径探索L-Rap对糖尿病视网膜病变的作用。�关键词��白细胞源性精氨酸氨基肽酶;功能;人视网膜血管内皮细胞;高糖;糖尿病视网膜病变中图分类号:R774����文献标识码:BExpressionofL-RapinHumanRetinalVascularEndothelialCellsCulturedwithHighGlucoseinvitroLIBin,HUJun,XIANGYan,LIGui-gang,MAOXiao-chun,XULing-juan.DepartmentofOph-thalmologyTongjiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan,430030,China�Abstract��Objective�TostudytheexpressionofL-Rapinhumanretinalvascularendothelialcellsthatwereculturedinhighglucose,andanalyzethefunctionofL-Rapproteinofhumanretinalvascularendo-thelialcells.Methods�Culturehumanretinalcapillaryendothelialcellswithhighglucose,mRNAwasdetec-tedbyrealtimePCR,3DproteinstructuremodelofL-Rapwasestablished,andthefunctionofL-Rapwasanalyzed.Results�ThemRNAlevelofL-Rapinhumanretinalcapillaryendothelialcellsthatwereculturedinhighglucosewasdown-regulated.L-Rapproteinmayplayaroleinangiogenesis,immuneandinflamma-toryfactorsaswellasinrenin-angiotensinsystem.Conclusion�L-Rapiscloselyrelatedtothediabeticretinopathy.WecanexploretheroleofL-Raponthediabeticretinopathyfromthreeways:angiogenicfac-tors,immuneandinflammatorycytokines,renin-angiotensinsystem.�Keywords��Leukocyte-derivedarginineaminopeptidase;Function;Humanretinalcapillaryendo-thelialcells;Highglucose;Diabeticretinopathy��当前对糖尿病视网膜病变(Diabeticretinopa-thy,DR)遗传因素的研究,绝大部分集中在寻找糖尿病患者并发DR的易感因素,却忽略了研究少数病人患糖尿病很长时间却没有并发DR的原因。在那些不易并发DR的患者,体内可能具有特殊的基因表达来抵抗糖尿病对视网膜血管的损伤,它们是对DR具有抵抗作用的基因,简称DR抵抗基因。根据这一思路我们利用基因芯片对比分析了易发生DR和不易发生DR患者差异表达的基因(另文发表),并选择在不易发生DR患者体内高表达的基因进行研究,我们从中选择白细胞源性精氨酸氨基肽酶(Leukocyte-derivedArginineAminopeptidase,L-Rap)进行研究,利用实时定量PCR验证了L-Rap在不并发DR的患者体内高表达,在此基础上进一步研究L-Rap对DR的作用。�340�中国微循环2008年12月第12卷第6期�材料和方法1�材料细胞培养试剂:2%胰酶(Sigma公司,美国),0.066%II型胶原酶(Gibco公司,美国),胎牛血清(四季青公司,中国),DMEM培养液(Gibco公司,美国),纤维连接蛋白(Invitrogen公司,美国),内皮细胞培养液(Gibco公司,美国),胰岛素-转铁蛋白-硒添加物ITS(Gibco公司,美国),内皮细胞生长因子ECGF(Sigma公司,美国),第�因子相关抗原抗体(DAKO公司,美国)。新鲜人眼球取自本科手术室角膜移植术后的...
